血小板在
血栓形成和止血过程中起着关键作用。临床研究表明,许多疾病的发生都与血小板活化有关,血小板在活化过程中,不仅形态和生化代谢发生改变,其膜蛋白的结构和组分也发生变化。血小板α-颗粒膜蛋白(α-granule membrane protein-140,颗粒膜蛋白-140)是血小板活化释放的特异标志之一,可反映体内血小板的活化程度及血栓形成倾向,为人类
血栓性疾病的早期诊断、治疗提供了一条新的途径,对其它疾病的诊断也具有重要的价值。
血小板在诱导剂刺激下,α-颗粒膜蛋白颗粒膜蛋白-140整合到活化血小板浆膜上,成为血小板活化的标记。利用
放射性核素标记的抗颗粒膜蛋白-140单克隆抗体直接测定血小板表面颗粒膜蛋白-140的含量,以反映体内外血小板的活化程度。
用塑料注射器抽取静脉血,以9∶1(V/V)的0.73mol/L EDTA-Na2抗凝,取0.5ml抗凝血与等量的固定剂混合。室温放置30min,即为固定的全血。以洗涤液调血小板数为2.5×106/L,取100μl固定全血(2.5×106血小板),用洗涤液洗涤1次,加入50μl(0.1μg/管)125Ⅰ-SZ-51抗体,充分混匀,室温30min。而非特异吸附以100倍未标记的SZ-51抗体同时加入反应管,以洗涤液洗3次。每个测定管均为复管,将特异结合在血小板上的cpm换算成每个血小板上颗粒膜蛋白-140的分子数(假定1个抗体分子与1个颗粒膜蛋白-140分子结合)。