PCR引物设计
找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列
PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列。引物的优劣直接关系到PCR的
特异性
与成功与否。
设计原则
1. 引物应用核酸系列保守区内设计并具有
特异性
。
2.产物不能形成
二级结构
。
3. 引物长度一般在15~30
碱基
之间。
4. G+C含量在40%~60%之间。
5. 碱基要
随机分布
。
6. 引物自身不能有连续4个碱基的互补。
7. 引物之间不能有连续4个碱基的互补。
8. 引物5′端可以修饰。
9. 引物3′端不可修饰。
10. 引物3′端要避开密码子的第3位。
参考资料
PCR引物设计
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最新修订时间:2023-06-26 00:04
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