SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示
组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法,是众多
免疫组织化学方法的一种。
SABC法:一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC(链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素)+ 辣根酶底物显色。目前常用的亲和素从链霉菌(streptomyces)培养物中提取,因此称为链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物技术(streptavidin biotin-peroxidase complex method,SABC法)。
生物素(biotin)为含硫的杂环单羧酸,分子量小,通过其羧基与蛋白质的氨基结合,从而可标记抗体和酶。亲和素(avidin)又称
抗生物素蛋白,是一种糖蛋白,在鸡蛋白中被发现,分子量为68 000。生物素与亲和素有很高的亲和力,1个亲和素分子上有4个生物素结合位点。在ABC法中,不对特异性第一抗体进行标记,而用生物素标记第二抗体,染色前按一定比例将亲和素与生物素标记的
过氧化物酶混合,制成ABC合物,并使亲和素分子上至少空出1个生物素结合位点。染色时,标本中的抗原先与第一抗体结合,后者再与生物素标记的第二抗体结合,然后加入ABC复合物,结合到第二抗体的生物素上,最终形成的复合物网络了大量的酶分子。因此,敏感性更高。