Taq聚合酶
生物术语
Taq聚合酶的缺点之一为催化DNA合成时的相对低保真性。它缺乏3’→5’核酸外切酶的即时校正机制,出错率为1/90000。
应用
水生栖热菌是一种生长在温泉、蒸汽管道等处的细菌,它体内的Taq聚合酶可以耐受90℃以上的高温而不失活,这在需要高温环境的PCR反应中有着重要意义。因此Taq聚合酶取代了之前常用于PCR反应的大肠埃希菌中的DNA聚合酶。PCR反应中应用Taq聚合酶,不需要每个循环加酶,使PCR技术变得非常简捷,大大降低了成本,PCR技术得以大量应用,并逐步应用于临床。
一般适用于DNA片段的PCR扩增DNA标记引物延伸序列测定平末端加A等,产物可直接用于T-A克隆载体
酶单位
1单位(U)Taq DNA 聚合酶活力定义为在74°C、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,将10nmol脱氧核苷酸掺入到酸不容物质所需的酶量。
发现
托马斯·D·布洛克(Thomas D. Brock)团队于1965年在美国黄石公园里热泉中发现并成功分离嗜热细菌海栖热袍菌(Thermus aquaticus)。Taq聚合酶是我国台湾科学家钱嘉韵女士所分离,钱嘉韵是第一个报道分离耐高温DNA聚合酶工作的,1973年,钱嘉韵(Alice Chien)就读于美国俄亥俄州辛辛那提大学生物系,她的导师对Thermus aquaticus十分好奇,就让钱嘉韵以该细菌作为研究主题。在另一位老师的指导下,钱学会了从细胞中分离蛋白质,成功分离出该细菌耐高温的TaqDNA聚合酶。Taq聚合酶是从嗜热细菌海栖热袍菌(Thermus aquaticus)中分离出的DNA聚合酶。
参考资料
最新修订时间:2024-03-27 23:16
目录
概述
应用
酶单位
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