‌DOS启动盘‌是一种包含DOS操作系统及其引导程序的存储介质，通常用于在计算机启动时加载到内存中，以便进入DOS操作系统界面，进行系统恢复、重装或杀毒等操作。

可以在计算机启动自检硬件后进入DOS操作系统的引导程序及其载体，它的载体可以是软盘，光盘，U盘，甚至移动硬盘等只要主板开机支持的外接存贮设备。基本原理是把DOS操作系统直接在开机时加载到内存中并运行，计算机直接进入DOS黑白屏界面，使用DOS命令从而进行GHOST等恢复系统，或重新安装恢复操作系统，杀毒等的操作。由于DOS属于古老的操作系统，WINDOWS2000以上版本的32位操作系统也不需要DOS的支持。但由于DOS是单进程操作系统，用于杀毒可以防止病毒的自我复制和自我保护。而且DOS非常小，用DOS启动盘可以直接不用硬盘运行在内存中，因此现在只能在计算机的维护中偶尔见到了它的身影。

制作DOS启动盘可以用USBOOT等工具。也可以用操作系统自己的功能进行制作。

DOS启动盘必须包含三个主要的文件，即：io.sys,msdos.sys,command.com。通常来说，为了使系统能够更合理的管理资源，用户还应该自行编辑config.sys以及autoexec.bat两个配置文件以及所需的内存管理文件及其它应用程序文件。

以使用Ultra ISO制作支持鼠标、光驱、U盘的DOS启动光盘镜像文件为例介绍方法：

第1步，运行Ultra ISO V8.62，在程序主窗口中依次单击“文件”→“新建”→“启动光盘映像”菜单命令。

第2步，打开“加载引导文件”对话框，找到并选中下载得到的DOS启动软盘镜像文件CDROM-1218.ima，然后单击“打开”按钮。

第3步，返回Ultra ISO程序主窗口，在“本地目录”窗格中找到并选中解压后的DOS实用工具文件夹。然后选中并右键单击全部DOS工具，选择“添加”命令。

第4步，设置完毕后依次单击“文件”→“保存”菜单命令。打开“ISO文件另存”对话框，设置文件保存位置并命名该文件，最后单击“保存”按钮。