三糖铁培养基是一种细菌培养基,主要是用来鉴别沙门氏与
志贺氏菌属等肠道杆菌,主要成分包括有牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、
硫酸亚铁、氯化钠、
硫代硫酸钠、酚红、琼脂、蒸馏水等。如同时含1%蔗糖,即成三糖铁培养基。
三糖铁培养基简介
2、主要成分:有牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、
硫酸亚铁、氯化钠、
硫代硫酸钠、酚红、琼脂、蒸馏水等。如同时含1%
蔗糖,即成三糖铁培养基。
3、主要成分的作用:
①本培养基用以观察细菌对糖的分解能力及是否产生硫化氢,可初步鉴别
细菌的类属。
大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖而产酸产气,使斜面与底层均呈黄色、且底层有气泡。
伤寒杆菌、
痢疾杆菌只能发酵葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖产酸使pH降低,因此,斜面和底层先都呈黄色,但因葡萄糖含量较少,所生成少量的酸可因接触空气而氧化,并因细菌生长繁殖较盛,分解氨基酸产生的碱性物质较多,致使斜面部分又变成红色;底层由于是在缺氧状态下,细菌分解葡萄糖所生成的酸类一时不被氧化而仍保持黄色。
②细菌若分解
含硫氨基酸产生硫化氢,则与培养基中硫酸亚铁化合成黑色的硫化铁。
③硫代硫酸钠能防止硫化氢被氧化,而影响硫化铁的形成。
④酚红为指示剂,酸性时呈黄色,碱性时呈红色。
⑤若细菌具有动力,可在底层穿刺线四周出现扩散生长现象,无动力的细菌则仅在穿刺线上生长。
其他类型的培养基
肉汤培养基
1、用途:供血液、骨髓标本的增菌培养,亦适用于烧伤标本的细菌快速检验及一般菌的增菌培养。
2、主要成分:有水、蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、
枸橼酸钠、硫酸镁、
青霉素酶、对氨苯甲酸、酚红溶液等。
3、各成分的作用:
①蛋白胨、牛肉膏:为主要
氮源,供细菌合成
菌体蛋白质,以供生长繁殖之用(亦可供给能量),也有维持渗透压的作用。
②葡萄糖:为主要
碳源,供给细菌新陈代谢活动所需要的能量。
③氯化钠:供细菌生长需要的无机盐,其作用为维持渗透压、构成菌体成分和酶的激动剂。
④枸橼酸钠:为抗凝剂,不使血液凝固成块,因此,可减少白细胞对病原菌的吞噬机会。
⑤对氨苯甲酸:能中和血中磺胺类药物的抑菌作用。
⑥硫酸镁:能破坏血中四环素、金霉素、土霉素、新霉素及
多粘菌素等的抑菌作用。
⑦青霉素酶:可破坏青霉素。
⑧酚红:为指示剂,细菌生长后分解葡萄糖产酸,使培养基pH降低,酚红指示剂变黄,培养液呈黄色,即可知有细菌生长。
⑨水:是细菌的营养、代谢过程中不可缺少的物质,水又是良好的溶剂,培养基中的许多营养物质均须溶于水才能被细菌吸收。
伊红美蓝琼脂
1、用途:分离肠道致病菌。
2、主要成分:有无糖琼脂、乳糖、伊红和美蓝水溶液。
3、伊红、美蓝及乳糖的作用:伊红为酸性染料、美蓝为
碱性染料,后者有抑制革蓝氏阳性细菌生长的作用,(但某些链球菌仍能生长),同时也起着指示剂的作用。当大肠杆菌分解乳糖产酸,细菌处于酸性环境中,菌体带正电,易与
酸性染料伊红结合,而伊红与美蓝又结合成1种复合物,故菌落不是红色而呈有
金属光泽之紫红色。痢疾杆菌等不能分解乳糖,亦不产酸,伊红和美蓝不能结合,则
细菌菌落为无色。
绿脓杆菌、
变形杆菌等有时可分解培养基中的蛋白胨而产碱,此时菌体带负电遂吸附美蓝使菌落着蓝色。由于这种培养基有鉴别某些细菌的作用,故称
鉴别培养基。
SS琼脂
1、用途:是分离
沙门氏菌属及志贺氏菌属的培养基。它对大肠杆菌有较强的抑制作用,而对肠道病原菌则无明显抑制作用,因此,可以增加粪便等标本的接种量,从而提高病原菌的检出率,它是目前公认比较满意的
选择性培养基。
2、主要成分:有蛋白胨、肉膏、琼脂、煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸钠、
枸橼酸铁、乳糖、中性红、水等。
3、各成分主要的作用:
①肉膏、蛋白胨等为营养物质。
②枸橼酸钠、硫代硫酸钠、胆盐及煌绿等能抑制革蓝氏阳性细菌及
大肠杆菌类细菌的生长。而胆盐又能促进
沙门氏菌的生长。硫代硫酸钠能防止硫化氢被氧化,而影响硫化铁的形成。
③中性红为指示剂,酸性时呈红色,碱性时呈黄色。
④大肠杆菌能分解乳糖,而多数病原菌不能分解乳糖。由于大肠杆菌迅速分解乳糖而产酸,使胆盐呈胆酸析出,因而形成中心浑浊及指示剂变色而呈深红色菌落。沙门氏及志贺氏菌属,通常不分解乳糖而分解蛋白胨产生碱性物质,故呈现透明的微黄色菌落。某些变形杆菌及沙门氏菌之菌落中心可显黑色,因为这些细菌产生硫化氢与枸橼酸铁中的铁离子结合,形成黑色硫化铁。
⑤硫化硫酸钠有缓和胆盐对志贺氏菌及沙门氏菌的抑制作用,并中和煌绿、中性红等染料毒性,且能使大肠杆菌的红色菌落颜色更鲜明。
⑥
SS琼脂是抑制能力强的选择性培养基,可以大量接种粪便标本。