上海公交49路运营于中国上海市徐汇区、静安区、黄浦区，为旅游专线，隶属于上海巴士第二公共交通有限公司。

上海解放初期，为调整线路布局，发展南北交通直达线，加强上海西区与中心城区的通勤线路，1956年之后，上海公交49路开通运营。

20世纪50年代，上海公交49路使用美制道奇客车运营。

1964年至70年代末，上海公交系统购置49辆从捷克进口斯柯达（SKODA）706RTO型柴油客车投入上海公交49路的运营。

20世纪80年代，上海公交49路设立行业新风宣传“为您服务”咨询台。

20世纪90年代后期，上海公交49路配备了沃尔沃超长公交车。

2020年2月7日，上海公交49路提高防控措施标准，实行一日三次消毒，每辆车的上下客门玻璃上粘贴了“车辆已消毒”的告示。

据2020年4月信息显示，上海公交49路上行长度约12千米，下行长度约12.2千米，连接了上海体育馆与上海人民广场。上海公交49路起于汉口路江西中路，途径上海人民公园、上海市政府、上海大剧院、上海市人民广场、威海路、延安中路、常熟路、中山医院、肿瘤医院、东安路、中山南二路、上海体育场等重要站点，止于上海体育馆站。

据2020年4月信息显示，上海公交49路上行设18个车站，下行设20个车站。

据2020年4月信息显示，上海公交49路汉口路江西中路站首末班为05:00-23:50，上海体育馆站首末班为05:00-23:51。

截至2020年4月，上海公交49路统一票价为2元，其它卡种优惠按规定执行。

2013年10月，上海巴士集团购置30辆12米长的三门式公交投入上海公交49路的运营。该车设置了三扇车门，中门左右两侧设有刷卡机。车辆使用低地板，前风窗带黑色立柱，车内设置了折叠座和轮椅区域。此外，该车车内驾驶员身后两侧设有2个“母子座位”，面积比单人座位大近一倍，适合大人小孩一起落座。

2019年10月，上海公交集团购置20辆电动智能公交车投入上海公交49路的运营。该车以白色为主色调，车门处的“侧跪功能”可减低上下踏板的高度，后门处的翻板可以方便轮椅车上下；车内设有轮椅车放置位置，车顶安装了9个探头，可以呈现车外360度的全景状况。该车驾驶区还设置了钢化玻璃材质的“防护隔离门”和可自由调节的司机座位。

2015年11月，上海公交49路公交车厢和公交候车廊增设了爱心候车专座。

2020年2月，上海公交49路车头配备了免洗洗手液。

上海公交49路先后获得1989年上海市劳模，1991上海市劳模，1997年上海市劳模，1992年全国五一劳动奖章，2005年、2010年全国劳动模范，2016年“最美线路”，2018年上海市五一劳动奖章，2019年“劳模先进号”。

二十世纪八十年代起，每逢“五一”“十一”等重大节日，上海巴士集团就会设计装饰彩车上街营运。2017年国庆、中秋节期间，上海巴士集团在上海公交49路投入六辆公交彩车上路。该公交彩车图案由电脑制作设计，车身广告纸粘贴采用了LED冷光源技术，配以具有视觉冲击效果的裸眼3D技术。

2017年1月17日，上海公交49路公交车粘贴新春祝福。该车将多种文化元素引入车厢，前后车门均张贴了新年窗花，每张座椅背面都悬挂着一个中国结，来搭配两侧车窗上的福字、灯笼和鞭炮图案，拓展了“文化线路”的品牌内涵。

2019年3月5日，上海公交49路首发“雷锋传承号”特色车组。该车车厢布置了雷锋的“傻子精神”“钉子精神”“为人民服务”等介绍，拉手印有雷锋的形象和格言。

2019年4月，上海公交49路升级为上海市第一辆“流动阅览车”，在前门旁特制书报架，摆放多种书刊杂志，车队还在上海体育馆起讫站设立固定借书点，供候车乘客借阅。此外，2019年7月1日每天下午4时起，上海公交49路车队向市民乘客赠阅200份当日的《新民晚报》。

上海公交49路串起了福州路文化街、常熟路老洋房、衡山路酒吧街，是一条具有浓厚上海文化气息和历史情怀的公交线路。（《新民周刊》评）

上海公交49路几十年来都是上海公交系统标兵中的标兵，车厢环境、司乘人员的服务态度和质量在上海是第一流的。乘上这趟车，既可以饱览市容美景，也可以感受到人文关怀。（上海市人民政府办公厅 评）