不对称PCR是利用 不等量的一对引物来产生大量单链DNA (ssDNA)的方法。不对称PCR制备的单链 DNA在用于序列测定时不必在测序之前除 去剩余引物，简化操作、节约人力物力。另 外，用cDNA经不对称PCR进行序列分析 或SSCP分析也是研究真核外显子的常用方法。根据实验设计的不同，不对称 PCR又可分为引物浓度不对称PCR和热不对称PCR。（侯一平）

释义

这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物；其最佳比例一般为1：50～1：100，关键是限制引物的绝对量。限制性引物太多太少，均不利于制备ss-DNA。也可用普通PCR制备靶DNA双链DNA（ds-DNA），再以ds-DNA为模板，只用其中一种过量引物进行单引物PCR制备ss-DNA。

产生的ds-DNA与ss-DNA由于分子量不同可以在电泳中分开，而得到纯ss-DNA。

不对称PCR主要为测序制备ss-DNA，尤为用c-DNA经不对称PCR进行DNA序列分析是研究真核DNA外显子的好方法。