二十里店镇，隶属于新疆维吾尔自治区昌吉回族自治州呼图壁县，地处县境中东部，东接昌吉市榆树沟镇，南与石梯子哈萨克民族乡接壤，西与园户村镇、呼图壁镇、种牛场相连，北与兵团农六师105团交界。区域面积310.97平方千米。2018年，户籍人口15642人。

1950年，属二区。

1958年，为跃进公社。

1978年，更名为二十里店公社。

1984年，设二十里店乡。

1996年，撤乡建镇。

2011年末，二十里店镇辖二十里店1个居民委员会，上头工、宁州户、二十里店、十四户、四工、下头工、小土古里、东滩8个村民委员会。

2019年10月，二十里店镇下辖二十里店镇社区1个社区；宁州户村、小土古里村、东滩村、十四户村、良种场村、林场村、四工村、二十里店村8个行政村。

二十里店镇地处县境中东部，东接昌吉市榆树沟镇，南与石梯子哈萨克民族乡接壤，西与园户村镇、呼图壁镇、种牛场相连，北与兵团农六师105团交界。区域面积310.97平方千米。

二十里店镇地处平原，地势平坦。

2011年末，二十里店镇辖区总人口14491人。

2017年，二十里店镇常住人口15795人。

2018年，二十里店镇户籍人口15642人。

2011年，二十里店镇有耕地面积22.3万亩，人均15.4亩，是国家重要的苗木生产基地。农业总产值11.1亿元，比上年增长15.7%。粮食作物以小麦、玉米为主，生产粮食2.5万吨，人均1725.2千克，其中小麦1.6万吨，玉米0.9万吨。主要经济作物有棉花、番茄等，棉花种植面积12.6万亩，产量3.6万吨，可向社会提供1.3万吨商品棉；番茄产量13.8万吨。畜牧业以饲养羊、牛、家禽为主，羊饲养量18万只，年末存栏9.1万只；牛饲养量1.4万头，年末存栏0.8万头；家禽饲养量262万羽，上市家禽261万羽，生产肉类6022吨，畜牧业总产值3亿元，占农业总产值的27%，农民人均纯收入1.3万元。

2011年，二十里店镇工业以煤化工、石油化工、棉花加工业、木材加工业、塑料制品生产、建筑材料生产为主。工业总产值达到5亿元，工业增加值占国内生产总值的79%，实现工业增加值1.3亿元，比上年增长12.3%，有工业企业22家。其中规模以上企业13家，职工723人，商业网点1554个，职工3721人，社会商品销售总额达1.1亿元，比上年增长11.3%；城乡集贸市场3个，年成交额1亿元，财政总收入420万元，比上年增长8.2%，金融机构各类存款余额9300万元；人均储蓄1.6万元；各项贷款余额2.4万元，比上年增长7.6%。

2018年，二十里店镇有8家工业企业，营业面积超过50平方米以上的综合商店或超市2个。

2011年末，二十里店镇有文化站1个，文化活动室8个图书室1个，农家书屋8个，藏书1.6万余册，有秧歌、腰鼓、快板文艺表演队伍3支。体育场11个，90%的村安装了健身器材，经常参加体育活动的人员占常住人口的84%，广播电视站1个，有线电视用户3800户，入户率85%。

2011年末，二十里店镇有幼儿园3所，在园幼儿319人，专任教师8人；小学1所，在校生887人，专任教师78人，小学适龄儿童入学率、初中适龄人口入学率、小升初升学率、九年义务教育覆盖率均达100%。

2011年末，二十里店镇有卫生院1所，卫生室9个，床位8张，专业卫生人员17人，医疗机构（门诊部以上）完成诊疗2.2万人次，法定报告传染病发病率为89.8/10万，农村安全饮用水普及率100%，农村卫生厕所普及率92%，新型农村合作医疗保险参合率98%。

2011年，二十里店镇有城镇最低生活保障户数26户，人数50人，支出15.2万元，比上年增长3.2%，月人均253.33元，比上年增长4.6%；城市医疗救助60人次，民政部门资助参加城镇医疗救助416人次，共支出2.1万元，比上年增长1.5%。农村最低生活保障户数151户，人数320人，支出45.1万元，比上年增长1.5%，月人均117.4元，比上年增长1.5%；农村五保分散供养47人，支出18.8万元；农村医疗救助47人次，民政部门资助参加合作医疗保险47人次，共支出2.4万元；农村临时救济120人次，支出3万元。国家抚恤、补助各类优抚对象41人，抚恤事业费支出20.5万元。

2011年，二十里店镇已形成由铁路、公路、管道3种运输方式构成的交通运输网络。铁路兰新线过境，境内长14千米，为双轨复线铁路，往东通往昌吉市榆树沟镇，往西通往园户村镇。连霍高速公路过境，境内长10千米，双向4车道，向东通往昌吉市榆树沟镇，向西通往园户村镇；312国道过境，境内长9千米，双向4车道，向东通往昌吉市榆树沟镇，向西通往园户村镇；201省道过境，境内长8千米，双向2车道，向东通往昌吉市榆树沟镇，向西通往呼图壁镇。输油、输气管道线过境，境内均长10千米。

2021年12月30日，入选2022年全国“村晚”示范展示点名单。