二氧化碳暗固定是不利用光能或无机物的氧化能而进行二氧化碳的固定。

二氧化碳暗固定 dark fixation of carbondioxide

主要的例子有渥德-瓦克曼反应。现已证实不论是自养还是异养的生物，就生物的所有主要群体来说，具有代表性的种，都进行二氧化碳的暗固定，作为三羧酸循环的中间体而生成二羧酸。与暗固定有关的二氧化碳固定酶，因生物种类不同而异。代表者有丙酮酸羧化酶、磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶、磷酸烯醇丙酮酸羧化酶、苹果酸酶等。

CO2+2H2O在光能和叶绿体的条件下生成(CH2O)+H2O+O2↑

CO2被固定并合成为糖