二氨基联苯胺（Diaminobenzidine,DAB）是辣根过氧化物酶最敏感、最常用的显色底物，反应产物因不溶于水、二甲苯和醇的棕色沉淀物而被广泛地用于蛋白印迹（Western Blot,WB）、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)和免疫细胞化学(Immunocytochemistry,ICC)、斑点印迹(Dot blot)和生物芯片(Biochip)等的染色和显色反应。

试剂盒应在-20℃，避光、密封保存。

使用前先用蒸馏水将B显色液（1:25）稀释为工作液，然后按比例（1:25）加入A显色液，混匀后立即使用。显色时间1-30分钟，显色时间过长可引起本底增高，故应密切观察显色过程（一般3-10分钟最理想），并在本底较浅且达到适当显色强度时以流水漂洗终止显色反应。

稀释方法：取去离子水920ul,加入B显色液40ul混匀，再加入40ul的A显色液，混匀后即可使用。工作液建议用量：免疫组化50-100ul/切片，WB每张膜200－5000ul/膜

1． DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用；

2． 显色工作液应现用现配，新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色，如颜色过深，请勿使用；

3． DAB在常温下不稳定，每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱，以免因DAB分解影响实验，或因渗漏造成实验环境污染；

4． DAB有潜在致突变作用，操作时应注意穿戴好防护用具。