二苯胺试剂_化学物质 - 线报百科mbji.cn

二苯胺试剂

化学物质

在沸水浴的条件下，DNA与二苯胺反应呈现蓝色。因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

配制

A液：1.5克二苯胺(C12H11N)溶于100ml冰醋酸(乙酸,C2H4O2)中，再加1.5ml浓硫酸，用棕色瓶保存（光下分解）。如冰醋酸呈结晶状态,则需加温后待其熔化,再使用。

B液：体积分数为0.2%的乙醛溶液(C2H4O)。

将0.1ml B液加入10ml A液中，制成二苯胺试剂，现配现用。

使用方法

1、配制二苯胺试剂取0.1mLB液，滴入到10mLA 液中，混匀。

2、鉴定：取4mLDNA提取液放入试管中，加入4mL二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色（不变蓝）。

用沸水浴加热。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化（逐渐出现浅蓝色）。

3、加热后冷却观察。

DNA在酸性条件下加热，其嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键断裂，生成嘌呤碱、脱氧核糖和脱氧嘧啶核苷酸，而2-脱氧核糖在酸性环境中加热脱水生成ω-羟基-γ-酮基戊醛，与二苯胺试剂反应生成蓝色物质。

参考资料

最新修订时间：2022-10-24 15:42

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