于乃佳出生于二十世纪九十年代。2010年，考取复旦大学上海视觉艺术学院影视话剧与音乐剧表演专业，在校期间，她曾在话剧《松子的爱》中担任舞蹈演员和出演话剧《梅兰芳》；此外，于乃佳还曾获得全国校园舞台剧大赛一等奖，以及全国统一琵琶考级十级资格认证。
2014年4月1日，与
刘威、
白永成等共同出演的家庭都市喜剧《
岳父太囧》在武汉文艺频道首播，饰演周天明的女儿周婷婷。2017年3月24日，与
李泽锋、
武强等合作出演的年代剧《
骑士的手套》在湖南电视剧频道首播，在剧中饰演陈小熙的好友麦子。
2018年11月28日，与李镇宇搭挡主演的剧情电影《
隐藏》上映，在片中饰演黎族少女符雨榕。2020年11月9日，与
李嘉铭、
文生领衔主演的古装武侠剧《
双夭记》在爱奇艺视频独播，饰演京城中的万夫长朝歌。
2021年2月22日，与
龚俊、
周也等合作出演的古装武侠剧《
山河令》在优酷视频首播，她在剧中饰演毒蝎杀手俏罗汉；2月25日，与
周彦辰、
徐好联袂主演的古装校园爱情剧《
通天书院》开播，在剧中饰演在蕙心学堂教舞技的兰姿；4月15日，搭挡
梁竞徽主演的青春都市剧《
红楼私房菜》在爱奇艺视频播出，饰演网络美食节目主播沈璐；10月17日，与
鞠婧祎、
曾舜晞等联合出演的古装爱情励志剧《
嘉南传》在腾讯、爱奇艺视频播出，饰演齐大人的孙女齐丹。
于乃佳不但古装扮相好看，她的现代装扮也很美，酷飒中又带点文艺气质。许多观众都将目光停留在了于乃佳身上，她有少见的文艺小清新风。于乃佳不断的在尝试更多不同类型的角色，其对人物的驾驭能力也颇强，因而导演和观众都很看好她（《BEAUTY》杂志、网易娱乐评）。
在家庭都市喜剧《岳父太囧》中，于乃佳饰演的周婷婷不仅甜美可人，清新脱俗的初恋女神气质更是令人难以忘怀，其甜美的笑容，温柔的声音，展现出了花样女神的范儿。于乃佳凭借个性清新的外形，精湛娴熟的演技，逐步蜕变成“演艺圈的潜力股”（网易娱乐评）。