分配色谱是
色谱法之一种,利用固定相与流动相之间对待分离组分子溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂,依靠
涂布、
键合、
吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。
1938年,
阿切尔·约翰·波特·马丁和理查德·劳伦斯·米林顿·辛格准备利用氨基酸在水和有机溶剂中的溶解度差异分离不同种类的氨基酸,马丁早期曾经设计了逆流萃取系统以分离维生素,马丁和辛格准备用两种逆向流动的溶剂分离氨基酸,但是没有获得成功。后来他们将水吸附在固相的
硅胶上,以氯仿冲洗,成功地分离了氨基酸,这就是常用的分配色谱。在获得成功之后,马丁和辛格的方法被广泛应用于各种有机物的分离。
硅胶或氧化铝上的薄膜色谱是一种吸附过程,吸附剂上的微量水份被强力吸附,使分配对于分离不起任何作用。由于这一物质的吸附活性,当薄膜在喷浸适当的固定相物质后,可做分配色谱之用。用市场上特制的
担体硅藻土G,因为没有吸附性能,可专作分配色谱之用。
脂肪族全部二羧酸酸,从
草酸到
癸二酸,都在硅藻土G薄膜正常分配色谱中,以
聚乙二醇为
固定相,以二异丙醚/甲酸/水为流动相,彼此能得到分离。薄膜的制备法:硅藻土G(40克)二硫代
二乙氨基甲酸钠盐0.05克,水45毫升和聚乙二醇19克,均匀混合调成糊状涂在20x20厘米玻板,放置10分钟吸干,在100℃加热30分钟,在干燥器内放冷,此后薄膜的操作即按常规方法。展开时,溶剂前沿行进12厘米需2小时。板上喷pH指示剂后,可看出各酸的谱位所在。
在薄膜中混入二硫代
二乙氨基甲酸钠盐之目的在于防止
聚乙二醇过氧化物的生成,固定相的平均分子量为800,只有高级的组分得到较好分离。
薄膜色谱虽有很大的分离能力,但不能分离脂肪族系较高分子量的组分,如碳14一24的脂肪酸,他们的甲醋总是聚在一个谱带上。利用薄膜的逆相分配色谱法,这个问题能得到解决。