化学免疫学
生物化学术语
化学免疫学immunochemistry 以抗体的结构,抗原抗体反应的物理化学分析,补体的结构和作用,,以及参与免疫的分子的结构机能为研究对象的科学
定义
中文名称:免疫化学 英文名称:immunochemistry 定义:研究免疫分子结构与功能的免疫学分支学科。 应用学科:免疫学(一级学科);概论(二级学科);免疫学相关名词(三级学科)
【作者单位】:中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院
【分类号】:R446.6
【DOI】:cnki:ISSN:1672-1535.0.2004-03-021
免疫组织化学简称免疫组化,是应用免疫学及组织化学原理,对组织切片或细胞标本中的某些化学成分,进行原位的定性、定位或定量的研究。这种技术称为免疫组织化学技术免疫组化是利用抗体与抗原的结合具有高度特异性的特点,采用已知的抗体检测组织或细胞的抗原物质,以期确定组织细胞是否存在未知抗原,并进行定性、定位或定量的研究。抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的,故必须借助组织化学方法,将抗体抗原反应部位显示出来。已知,组织或细胞凡是含有诸如蛋白质,多肤,多糖、磷脂、受体激素核酸氨基酸病原体等抗原物…
免疫细胞化学
(immunocytochemistry)
是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术,根据抗原与抗体特异性结合的特点,检测细胞内某种多肽蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。肽类与蛋白质种类繁多,均具有抗原性,当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种动物体内,则产生与该抗原相应的特异性抗体(免疫球蛋白);将抗体从血清中提出后,结合上某种标记物,即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片标本孵育,抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合,结合部位被标记物显示,则在显微镜下观察到该肽或蛋白质的分布。用荧光素(常用异硫氰酸)标记抗体,并于荧光显微镜下观察,称免疫荧光术。如抗体与辣根过氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)等结合,进行酶显示后,可在光镜或电镜观察,用于电镜者则称为免疫电镜术(immunoelectronmicroscopy)
标记抗体与抗原结合方式主要有两种:①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标记物。通过这样的放大作用,使抗原分子上的标记物大大增多,故间接法较直接法的敏感性大为增高,约高5~10倍,故应用更为广泛。间接法中较常用的,如过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物法(peroxidaseanti-peroxidasecomplexmethod, 标记方法PAP法),该法除需一抗和二抗外,还需要制备HRP标记的抗酶抗体,即以HRP作为抗原免疫动物,制成抗HRP抗体,再以HRP对标记该抗体,制成稳定的环形PAP复合物。标本先后经一抗、二抗和PAP复合物处理后再以DAB显色抗原存在部位可见棕黄色产物。
发展
免疫细胞学技术有了很大进展,各种新方法相继建立。单克隆抗体(monoclonalantibody)制备技术极大地提高抗体的特异性与免疫组化染色的精确性。继PAP法之后由于生物素-亲合素等试剂的应用,为检测微量抗原、受体、抗体提供了更精确的技术。常用的生物素-亲合方法有:标记亲合素-生物素法(labelledavidin-biotinmethodLAB法)、桥连亲合素-生物素法(bridgedavidin-biotinmethod,BAB法)及亲素-生物素-过氧化物酶复合物法(avidin-biotin-peroxidasecomplexmethod,ABC法);现市上有配制成的ABC药盒供应,使用简便,是广泛应用的一种方法。
参考资料
最新修订时间:2024-05-21 16:10
目录
概述
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