单层柱状上皮由一层棱柱形细胞组成。
细胞核呈椭圆形，位于细胞基底部。单层柱状上皮分布于胃、肠、子宫和
输卵管的内腔面，其功能主要是吸收和分泌。
在某些器官的
柱状细胞表面常附有特殊结构。例如，小肠粘膜的
上皮细胞有
纹状缘；输卵管和子宫等处的粘膜上皮表面都附有纤毛，因此称单层柱状纤毛上皮。
低倍镜下十二指肠横切片，可见到小肠的腔面有许多高矮不一的
指状突起，这些突起是
小肠绒毛的
纵断面。其表面覆盖着一层
柱状上皮，选择一部分排列整齐，换高倍镜观察。
在高倍镜下，柱状细胞排列紧密，细胞的高度大于宽度，细胞界限不太清晰。胞核呈椭圆形，位于细胞的基部。细胞的游离面（朝向
肠腔的一面）上，在
光学显微镜下可见到一薄层红染的结构称纹状缘（电镜下为
胞质的微小突起称
微绒毛），细胞的基底面与
基膜相接（基膜用
特殊染色才可显示出来），基膜的下方为
结缔组织。
在柱状
上皮细胞之间，有散在的
杯状细胞。杯状细胞外形呈高脚酒杯状，顶部充满粘原颗粒，基部有
细胞核。