南京公交25路（Nanjing Public Transport Line 25）运营于中国江苏省南京市鼓楼区、玄武区、秦淮区，于1992年9月1日开通，为市区线路，隶属于南京公交集团江南公交第一巴士客运有限公司。

1992年9月1日，南京公交25路开通。

2005年，南京公交25路延伸到石林家居广场。

2020年12月19日，南京公交25路于中央路东侧玄武湖公园站对面增设玄武门地铁站南站，路东侧玄武湖公园站同步更名为玄武门地铁站南站。

2021年5月25日，南京公交25路恢复至中央北路、中央门立交、中央路等路段行驶，原中央北路东门街站命名为中央门北站（1站台），南京公交25路恢复停靠中央门北站（1站台）、中央门南站（路西侧）。

截至2023年3月，南京公交25路起于北崮山站，途经北崮山路、中央北路、中央路、中山路、中山东路、解放路、瑞金路、御道街、蓝旗街、紫金路、苜蓿园大街、光华路，止于为南理工科技园站

截至2023年3月，南京公交25路上下行均设30个站点。

截至2023年3月，南京公交25路首末班时间如下所示：

截至2023年3月，南京公交1路采用无人售票单一票制，单程票价2元。使用南京市民卡或金陵通卡乘车享受8折的折扣票价，在90分钟之内换乘其他公共交通工具（包括公交、地铁、轮渡、有轨电车）时，可享受换乘优惠，换乘刷卡享受1元/次的优惠。

截至2022年9月，南京公交25路配备26台新能源空调客车。

截至2022年9月，南京公交25路配备急救药箱，每到酷暑和雨雪天气配备防暑降温药品和雨伞。

2016年7月29日，南京公交25路荣获全国“爱国拥军模范单位”称号。

2020年4月17日，江苏省总工会授予南京公交25路江苏省“工人先锋号”称号。

此外，南京公交25路还被南京市总工会授予南京市“工人先锋号”荣誉称号，被中国共青团南京市委员会授予南京市“青年文明号”荣誉称号。

2013年8月，南京公交25路全线40辆公交统一在车头贴上心形的“双拥线”标志，在车厢内配备了应急保健箱，还聘请干休所的老干部、家属等10人为“行风监督员”。

位于北崮山的省军区南京第一干休所是华东地区唯一一所级别最高的部队干休所，在里面休养的老干部最低级别也达到了副军级。1992年，住在干休所的老干部们出行极不方便，经过联系磋商，一条专门服务于老干部的南京公交25路“拥军车”应运而生。

30年来，南京公交集团第一客运分公司几经更名，公司领导也换了好几茬，但始终牢记双拥工作政治责任，积极传承拥军服务优良传统，每年公交公司筹划年度工作，都要把南京公交25路突出出来。公司购置新车，先给南京公交25路配备；公交线路调整，首先征求干休所意见；车辆维护整修，先从南京公交25路开始，让老干部优先享受更好服务。南京公交25路已成为南京市双拥工作的一个活动宣传橱窗、一艘流动的双拥之舟，每天展现的是军爱民、民拥军的动人画卷，每天承载的是浓浓的军民鱼水深情。（南京日报·紫金山新闻 评）