参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。

通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。在色谱分析中，有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰，计算机在数据处理中不会计入它们，不影响测定。

用分光光度计测量，被测的都为液体，通常是稀释后的，要测的是溶质吸光度，而溶剂也是有影响的，所以要有参比，以参比溶液调节零点，去除溶剂对溶质吸光度的影响。

在进行光度测量时，利用参比溶液来调节仪器的零点，可以消除由于吸收池壁及溶剂对入射光的反射和吸收带来的误差，并扣除干扰的影响。参比溶液可根据下列情况来选择。

A 当试剂及显色剂均无色时，可用蒸馏水作参比溶液。

B显色剂为无色，而被测试液中存在其它有色离子，可用不加显色剂的被测试液作为参比溶液。

C 显色剂有颜色，可选用不加被测试液而加入显色剂的溶液作为参比溶液。

D显色剂和试液均有颜色，可将一份试液加入适当掩蔽剂，将被测组分掩蔽起来，使之不再与显色剂作用，而显色剂及其它试剂均按试液测定方法加入，以此作为参比溶液，这样就可以消除显色剂和一些共存组分的干扰。

E 改变加入试剂的顺序，使被测组分不发生显色反应，可以把此溶液作为参比溶液消除干扰。

1．溶剂： 试样组成简单，共存组分对测定波长的光无吸收。

2．试液：试样基体溶液在测定波长有吸收，显色剂自身无色，可按与显色反应相同的条件处理试样，只是不加入显色剂。

3．试剂：显色剂或其它试剂对测定波长有吸收，按显色反应相同的条件，不加入试样的试剂。

4．平行操作参比： 用不含被测组分的试样，在相同的条件下与被测试样同时进行处理，得到平行操作参比溶液。

如在进行某种药物浓度监测时，取正常人的血样与待测血药浓度的血样进行平行操作处理，前者得到的溶液即可作为平行操作参比溶液。