多聚酶链反应
生物技术术语
多聚酶链反应是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的新方法。1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。该方法一改传统分子克隆技术的模式操作简便,在数小时内可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增数倍,大大提高了DNA的得率。已广泛应用到分子生物学研究的各个领域。
引物设计的基本原则是最大限度地提高扩增效率和特异性,同时尽可能抑制非特异性扩增。反应中的引物至少应含有18个与模板序列完全互补的核苷酸(常用软件通常默认为20个),最大不能多于38个,否则最适延伸温度会超过TaqDNA聚合酶的最适温度(74℃),不能保证PCR扩增产物的特异性这样才能保证扩增反应的特异性。
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最新修订时间:2022-03-25 15:09
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