大司祭（high priest）是以民司祭团中的首长，亦称为司祭长（列下廿五18；编上廿七5；编下卅一10等）。他在以民的历史上曾有过举足轻重的地位，他是以民和天主之间的中保，代替百姓向天主奉献祭祀；尤其应在每年的赎罪节日上，向天主奉献祭品，以获得百姓罪过的赦免。以民历史上的第一位大司祭是亚郎(出廿七～廿八5；四○12，13)。以后的继任者都应是出于亚郎家族的首生男子，除非他生来有阻碍或缺陷(肋十六32～34；户三1～4；编上五27～41；廿四1～5)。他的职务是终身制的(户廿五10～13)；他的祝圣礼颇为冗长复杂，需要七天之久才能完成，因为除了沐浴、更衣之外，还要傅油和祝圣(出廿九1～37；肋八5～35)。

大司祭应当遵守更严格的圣洁法规，例如不能接触尸体，就连自己父母亲的尸体都不能触摸，也不能蓄发或留胡子或撕破衣服，以表示丧礼的悲哀。他不能娶寡妇、离婚妇女或不贞的女子为妻，而只能纳以民间的贞女作为自己的妻子(肋廿一10～15)。大司祭所犯的任何罪过都会使整个的以民受到影响，应为此奉献特别的祭礼(肋四1～12)。大司祭过世时，杀人犯应获得赦免，可以离避难城市而自由他往(户卅五25，28，32)。

每年提市利月的第十天是以民的赎罪节日，是以民的大节日，也是梅瑟法律规定的惟一应守斋的一天。这特别是大司祭应主礼的一天，他七天以前就应离家，住在圣殿旁边的一个房间内，准备献祭节日当天他应沐浴(肋十六4)。这天的礼服比较简单，可能为了献祭的方便，只穿亚麻短裤，亚麻长衣，系上亚麻腰带，戴上亚麻头巾就可以了(肋十六23，24)。先有一青年肋未人牵来一只公牛犊，大司祭要在牛犊头上覆手，将自己和自己家人的罪过，放在牛犊身上，然后将牛犊杀死，将它的血带到至圣所内，洒在赎罪盖上七次，并要献香。第二次的祭献是为百姓的罪过，在两只公山羊中抽签，抽中者就被杀，再用它的血撒在至圣所内的赎罪盖上，将剩下的血涂在祭台的四个角上(出卅10)。然后大司祭覆手在另一只公山羊的头上，承认百姓的罪过，将这只山羊领到旷野之中，将它杀死。如此全体以民在天主面前按法律就成了无罪的民族。然后大司祭再穿上他的全幅礼服带着火盘、乳香和牲血，再度进入至圣所内，到约柜上的赎罪盖前，献香、洒血为自己、家人和全体百姓奉献赎罪之祭，完成了赎罪节的隆重仪式。

大司祭有时也参与政事，主持会议，给君王举行傅油礼(列上一7，8，39；列下十一12)。充军之后以民的政权从未正式恢复，大权渐渐落入大司祭之手。后来在罗马帝国的占领时期，大司祭的职权更成了贿赂的对象。自公元前第二世纪始，大司祭更成了宗教和政治的全权代理人，统一治理政务和教务(友四6～8；加上十二6；加下十10；十一27)，成为「公议会」的最高首领。