平衡透析法是用于测定溶液中小分子或离子与大分子间结合的技术。将大分子溶液和小分子溶液分别置于只允许小分子透过而不允许大分子透过的半透膜两侧，当透析达到平衡时，测定膜两侧溶液中小分子的浓度，即可分析得到大分子与小分子结合的数据。

平衡透析法的透析动力是扩散压。扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度与膜的厚度、透析的小分子溶质在膜两边的浓度梯度及透析温度等因素有关。虽然还没有测定蛋白与药物小分子结合的标准方法，但平衡透析法通常被认为是参考方法，因为它能直接测出来与蛋白结合的药物小分子的数量，这是分析蛋白与小分子物质结合的关键，从而能求出结合位点数及结合常数，因此该法被认为是比较准确的方法。