循环肿瘤细胞是指恶性肿瘤在发展过程中播散并存活于外周血中的肿瘤细胞,与肿瘤的转移和预后密切相关。循环肿瘤细胞检测是指对肿瘤患者外周血中的循环肿瘤细胞进行分析的方法,有助于肿瘤转移患者的诊断、监测术后患者肿瘤的复发与转移、评估抗肿瘤药物的敏感性与患者预后以及选择个体化治疗的策略。
检查前准备
向被检测者解释本操作的目的、方法等,消除顾虑;一般选取血液进行检测,采血前一天应清淡饮食,避免饮酒以免影响结果,采血时避免情绪紧张。
操作方法
目前循环肿瘤细胞的检测方法主要有两大类:细胞计数法和核酸检测法。
1. 细胞计数法
(1)免疫细胞化学法:以显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和细胞化学呈色反应对相应抗原进行定位、定性和定量测定。但每个载玻片上所能检测的细胞样本数量有限,可能会增加操作难度。
(2)流式细胞术:首先应尽快完成单细胞悬液样本的制备,针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化等清除杂质,使粘附的细胞彼此分离而形成单细胞状态,对样本进行荧光标记,通过检测标记的荧光信号,对单细胞悬液中的单细胞进行细胞定量分析和分选。应用流式细胞术检测癌细胞的价值在很大程度上依赖于可分析的细胞数量。
2.核酸检测法
包括聚合酶链反应和反转录聚合酶链反应,主要通过检测肿瘤患者外周血中的癌基因、抑癌基因的突变或致瘤病毒序列,也可以通过检测某些基因改变后RNA来反映循环肿瘤细胞情况。但由于样品的污染和目的基因在正常细胞表达等的影响,容易产生假阳性结果,从而影响检测的特异性。
临床意义
循环肿瘤细胞在肿瘤患者外周血中数量稀少,一般在106~107个白细胞中仅含有1个。循环肿瘤细胞检测在乳腺癌、肺癌、结直肠癌及前列腺癌等转移性实体瘤的微转移、监测术后复发、疗效评估与预后及个体化靶向治疗等方面的有重要作用。目前,对于循环肿瘤细胞的检测和分析比较困难,研究主要集中在寻找循环肿瘤细胞的特异性标志物并提高检测手段的敏感性和特异性。