括约肌间沟是是一个重要的临床标志，用手指抵在肛管内壁逐渐向下可触及此沟。括约肌间沟就是肛门白线，距肛缘上方约lcm。

此沟正对内括约肌下缘与外括约肌皮下部的交界处。一般看不到，只能摸到。沟的上缘即内括约肌下缘，下缘为外括约肌皮下部的上缘。外括约肌皮下部与内括约肌之间的间隙很小，有来自联合纵肌的纤维在此呈放射状附着于括约肌间沟附近的皮肤，故该处皮肤较固定，有支持肛管的作用。