分类
1.高压蒸汽法
（1）此方法最常用。
（2）适用于能耐高温的物品，如金属器械、敷料、搪瓷、玻璃、橡胶制品等。
（3）高压蒸汽灭菌器分为预真空式和下排气式两类，以前者应用最普遍。
（4）当蒸汽压力达到104.0～137.3kPa，温度可达121～126℃，维持30分钟，即能杀灭包括细菌芽孢在内的一切微生物。
2.煮沸法
（1）需要使用专用的煮沸灭菌器。
（2）适用于金属器械、玻璃制品及橡胶类物品。
（3）在水中煮沸至100℃，并持续10～20分钟，一般细菌即可被杀灭。带芽孢的细菌至少需要煮沸1小时。
3.火烧法
（1）紧急时方可使用。
（2）适用于金属器械的灭菌。
（3）可以使锐利的器械变钝并失去光泽，不宜常用。
4.药液浸泡法
（1）锐利器械、内镜、腹腔镜等不适于热力灭菌的器械，可用此法。
（2）常用的药液有以下几种：①1∶1000苯扎溴铵溶液，常用于已消毒的持物钳的浸泡。②70%乙醇溶液，用途与苯扎溴铵溶液相同。③10%甲醛溶液，适用于输尿管导管、塑料类、有机玻璃的消毒。④2%戊二醛水溶液，常用于刀片、剪刀、缝针及显微器械的消毒。⑤1∶1000氯己定溶液，常用于已消毒的持物钳的浸泡。
5.甲醛蒸汽熏蒸法
（1）熏蒸1小时可达到消毒目的，灭菌需要6～12小时。
（2）熏蒸的空间要密闭。
手术人员的准备
1.进入手术室前，手术人员要剪短指甲，应尽可能避免本身、特别是手部受到致病菌污染。
2.进入手术室时，要更换清洁鞋和衣裤。
3.进入手术室后，手术人员进行手和前臂消毒，穿戴无菌的手术服、口罩以及手套。
患者手术区的准备
1.包括手术区域皮肤的清洁和消毒，目的是消灭拟做切口处及周围皮肤上的细菌。
2.清洁皮肤时用肥皂水清洗，消毒皮肤时用碘酊涂擦皮肤，也可用碘伏溶液和1∶1000苯扎溴铵溶液涂擦。
3.清洁皮肤由术区中心向四周涂擦。感染伤口或肛门、会阴部位则由外周向术区中心涂擦。
4.术区消毒区域包括手术切口周围15cm。
5.手术区域消毒后铺无菌单。
无菌操作原则
1.手术人员无菌区的规定
手术人员肩部以下、腰部以上的身前区以及双侧手臂属于个人的无菌空间。手术台及器械推车铺设无菌单后，台面范围属于无菌区。
2.更换手套
术中如手套破损或接触到有菌的地方，应更换手套。如无菌巾、布单已被浸湿，应加盖干的无菌布单。
3.器械的传递
不可在手术人员的背后传递器械或物品。
4.清点物品
手术开始前要清点敷料、器械。手术结束时，检查腹、胸等体腔，并核对器械、敷料数量，以免异物遗留腔内，产生严重后果。
5.同侧手术人员的换位
一人应先退一步，背对背地转身到达另一位置，以防触及对方背部非无菌区。
6.参观人员
参观手术的人员不能太多，应与手术者和无菌器械台保持30cm以上的距离，并减少人员在手术间的走动。
手术室的管理
1.凡进入手术室的人员，必须换上手术室的清洁鞋帽、口罩和衣裤。
2.参观手术的人员不宜超过2人。
3.患有急性感染性疾病，尤其是上呼吸道感染者，不得进入手术室。
4.手术室需要有良好的管理制度，以保证手术室的洁净环境。
5.当一个手术室需连续作数台手术时，应先作无菌手术，后作污染或感染手术。
6.每次手术完毕后或每天工作结束时，都应彻底擦拭地面，清除污液、杂物和敷料等。
7.手术室内应定期消毒。