杜肖雄出生于辽宁本溪，她在北京电影学院高职班读书时，在张艺谋的电影《
满城尽带黄金甲》中，为巩俐做替身，之后又考上了辽宁大学的研究生，并且还去了英国留学，进修语言。
2007年，与
于月仙合作出演农村爱情喜剧《
乡村爱情故事》，饰演刘一水的妻子谢小梅，而这也是她的首部影视剧作品；2008，出演
赵本山执导的农村爱情喜剧《
乡村爱情2》。
2009年，出演吴兆珊执导的乡村喜剧《
女人的村庄》，在剧中饰演村里会计秀玉；同年，与闫学晶，李菁菁合作出演农村家庭剧《
女人当官》，饰演城里送货姑娘袁玉飞。
2010年，与毕畅、贺树峰合作出演农村爱情喜剧《乡村爱情交响曲》，在剧中饰演刘一水的爱人谢小梅。2011年，与赵本山、贺树峰合作出演农村爱情喜剧《乡村爱情小夜曲》。
2012年，出演
付百良执导的家庭伦理剧《火红的日子》，饰演城里水果店老板王丽娜。2013年，出演
刘流执导的农村爱情喜剧《
乡村爱情变奏曲》，饰演养殖场副厂长谢小梅。2014年，与
赵本山、
王小利合作出演农村爱情喜剧《
乡村爱情圆舞曲》。
2015年，在刘子威执导的都市喜剧片《
练胆儿》中，饰演性格倔强的萌萌。2016年，出演周浩东执导的网络喜剧电影《
囧人阿玖之疯狂24H》。
杜肖雄身材高挑、甜美稳重，被网友称为温婉佳人，生活中的她还是个比较时尚的姑娘，戏外淡妆显得清新可爱，个性且不失气质，她有一组写真还有一点刘诗诗淡雅的感觉。并且她还是本山传媒里可塑性很强的女演员，在《乡村爱情》系列剧中扮演谢小梅，表演也受到了很多观众的肯定。另外，她有过在英国留学进修语言的学习经历，因此气质上也更学院派一些，追求真爱又独立坚强。（南海网、北青网、沈阳晚报评）