溴酚蓝,是一种有机化合物,分子式为C19H10Br4O5S,分子量为669.961,浅黄色到棕黄色粉末;易溶于
氢氧化钠溶液,溶于甲醇、乙醇和苯,微溶于水(约0.4g/100ml),最大吸收波长422nm。
浅黄色到棕黄色粉末;易溶于
氢氧化钠溶液,溶于甲醇、乙醇和苯,微溶于水(约0.4g/100ml);最大吸收波长422nm
2.将酚红溶于冰乙酸中,加热至沸,滴加溴溶于冰乙酸中的溶液,黄色固体析出时,过滤,用乙酸洗去游离溴,置于空气中干燥后即得粗品。用冰乙酸或丙酮与冰乙酸混合溶剂重结晶,得纯品溴酚蓝。
3.将酚红和溴分别溶于醋酸中,制成溶液。先将酚红醋酸溶液加热至沸,然后在搅拌下缓慢加入溴的醋酸溶液:当酚红反应完全且黄色晶体不再析出后,冷却,过滤。用少量醋酸洗去结晶中的游离溴后,用醋酸或丙酮 醋酸进行重结晶,在空气中干燥得纯品溴酚蓝。
配western blot用的2*SDS上样缓冲液需要用到0.1%的溴酚蓝,2-DE中溴酚蓝一般也是配成0.1%母液。实际上,溴酚蓝在水中的溶解度不高,直接将0.1g溴酚蓝溶于100ml水是有困难的。下面是其较合适的配制方法:
0.05%的溴酚蓝配制方法:取溴酚蓝0.1g,加0.05mol/L
氢氧化钠溶液3.0ml使溶解,再加水稀释至200ml,即得。 变色范围pH2.8~4.6(黄→蓝绿)。只是不知道加入NaOH会不会影响2-DE实验。估计影响不大,因为指示剂用量毕竟很少。