是指将待灭菌物置于沸水中灭菌的方法。煮沸时间通常为30-60分钟。该法灭菌效果较差，常用于注射器、注射针等器皿的消毒。必要时可加入抑菌剂，如
三氯叔丁醇、
甲酚、氯甲酚等，以提高灭菌效果。
①煮沸灭菌的器械必须完全泡在水中，不可露出水面，锅底要放纱布以防止震动；②煮沸时盖好锅盖，保持沸点，灭菌时间从煮沸之后算起，中途加入其它物品应重新计时；③玻璃器皿可先放入冷水中，逐渐加热至沸，以防破裂；④丝线及橡胶类在煮沸后加入，持续10~15分钟取出，以免加速其变质老化；⑤煮沸器械时，必须将器械上的油污擦净，器械的咬合部位应张开，使之能与沸水接触；⑥锐利器械最好不要用煮沸法消毒，以免变钝。