电泳迁移率变动分析
分析方法
放射性同位素标记待检测的片段(即探针DNA),然后与细胞提取物共温育,形成DNA-蛋白复合物,将该复合物加到非变性聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳。
定义
电泳迁移率变动分析,又称凝胶阻滞实验,英文名electrophoretic mobility shift assay,简称EMSA。是体外利用电泳迁移率的变化来分析DNA与蛋白质相互作用的一种特殊的凝胶电泳技术。
实验方法
通常用32P标记DNA分子,而不标记蛋白质。电泳结束后,用放射自显影技术显现具放射性标记的DNA条带位置。如果细胞蛋白提取物中不存在与同放射性标记的DNA探针结合的蛋白质,那么所有放射性标记都将出现在凝胶的底部;反之,将会形成DNA-蛋白质复合物,由于受到凝胶阻滞的缘故,放射性标记的DNA条带就会出现在凝胶的不同部位。
应用
参考资料
最新修订时间:2022-05-04 19:59
目录
概述
定义
实验方法
应用
参考资料