硝酸盐还原(nitrate reduction)是生物体内的一种
氧化还原反应,即硝酸盐受硝酸还原酶的作用,还原成亚硝酸的反应。一般指有些细菌具有还原
硝酸盐的能力,可将硝酸盐还原为
亚硝酸盐、氨或氮气等。
硝酸盐广泛存在于海水、土壤中,厌氧性硝酸还原细菌能以硝酸盐作最终受体
氧化有机化合物,并利用其能量而生长,称此为硝酸呼吸(nitrate respiration)。这种反应形式和生理作用与有氧呼吸极为相似,是一种效率远比
发酵为佳的能量获得形式。在硫黄细菌中也同样有以
硝酸盐氧化硫黄及其化合物,并利用其能量进行无机营养型的生长(在这种情况下,硝酸盐的变化并不停留在亚硝酸的阶段,可以看到分子态氮的出现脱氮作用)。硝酸还原能力在细菌分类上是重要的记载事项。但是,有硝酸还原能力的菌未必都能在无氧中生长。
根据某些细菌能还原硝酸盐为
亚硝酸盐,亚硝酸盐与醋酸作用,生成亚硝酸,亚硝酸与试剂中的
对氨基苯磺酸作用生成重氮基苯磺酸,后者与
α-萘胺结合生成N-α萘胺偶苯磺酸这个原理进行的试验方法。
方法:将被检查部分的取出的培养液中待检菌接种于
硝酸盐培养基(内含小倒管)中,35℃孵育1-4d。将甲、乙等量混合液(用时混合)0.1ml加于试管内,立即或10min内观察结果。做此试验时,应以一支未接种细菌的培养基做对照试验,只有对照管阴性时,才能判定。
结果:出现红色为阳性反应。如欲观察有无氮气产生,可于培养基管内加1只小倒管,有气泡产生,则表示有氮气生成。如欲检查培养基中硝酸盐是否被分解,可取锌粉少许加入培养基内,如出现红色表明硝酸盐仍存在;若不出现红色,表示硝酸盐已被分解。
本试验广泛用于细菌鉴定。
肠杆菌科细菌均能还原硝酸盐为亚硝酸盐;
假单胞菌属中有的细菌能产生氮气,如
铜绿假单胞菌、
嗜麦芽窄食单胞菌、斯氏
假单胞菌,有的则能还原硝酸盐为亚硝酸盐,如鼻疽假单胞菌等;厌氧菌如韦荣菌也能还原硝酸盐为亚硝酸盐。
异常结果:肠杆菌科细菌引起肠道外感染以
泌尿道感染为多见,机会性致病可引起化脓性炎症,如胆囊炎、腹膜炎、肺炎、脑膜炎和
败血症等。
绿脓假单胞菌属感染:坏疽深脓疱病、
绿甲综合征、外耳道炎、毛囊炎。还有某些厌氧菌所致的一些疾病。
硝酸盐还原过程可因细菌不同而异。有的细菌仅使硝酸盐还原为亚硝酸盐,如
大肠埃希菌等;有的细菌可使其还原为亚硝酸盐和离子态的铵;有的细菌能使硝酸盐或亚硝酸盐还原为氮,如沙雷菌属;有的细菌还可以将其还原产物在合成性代谢中完全利用。试验要根据试验结果进行判断,还要排除干扰。