细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。一般细胞传代之后,经过短暂的悬浮然后贴壁,随后度过长短不同的潜伏期,即进入大量分裂的指数生长期。在细胞达到
饱和密度后,停止生长,进入平顶期,然后退化衰亡。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化,典型的
生长曲线可分为生长缓慢的潜伏期,
斜率较大的指数生长期,呈平台状的平顶期及退化衰亡4个部分。以存活细胞数(万/mL)对培养时间(h或d)作图,即得生长曲线。
1.取生长良好接近汇合的细胞,用
胰酶消化,用新培养基制成细胞悬液后计数(见四、细胞
传代培养的实验步骤)。如是非粘
壁细胞,则离心弃旧培养基后,换上一定量的新鲜培养基然后制成细胞悬液计数。
4.根据细胞计数结果,以单位细胞数(细胞数/mL)为纵坐标,以时间为横坐标绘制
生长曲线。