各种被分离化合物在展层剂中的溶解度及其与聚酰胺形成氢键能力的大小不同，决定它们在展层过程中迁移的速度差异，从而分离。

聚酰胺薄膜层析是1966年后发展起来的一种新层析技术。由于它具有灵敏度高，分辨力强，快速，操作方便等优点，已被广泛应用于各种化合物的分析。

聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离物质在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能使分离物质达到分离目的。