生物学中,
基因工程的基本操作,表达载体(Expression vectors)就是在
克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如
启动子、
RBS、
终止子等),使
目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的
大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒
复制起点和
氨苄青霉素抗性基因。
常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用
限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端(多为
黏性末端,也有
平末端),采用
DNA连接酶连接,导入生物体实现表达。标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到
染色体DNA中。
表达载体(Expression vectors)就是在
克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使目的基因能够表达的载体。如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的
大肠杆菌表达载体。其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒
复制起点和
氨苄青霉素抗性基因。在表达元件中,有一个杂合tac
强启动子和
终止子,在启动子下游有RBS位点(如果利用这个位点,要求与ATG之间间隔5-13bp),其后的
多克隆位点可装载要表达的目标基因。