从来研究酸性粘多糖者多以软骨、皮肤、角膜等为原料,事实上许多慢性疾病常常波及到肺、肾、
心等器官中之疏松结缔组织。由于这类器官中之酸性粘多糖含量极少,而且
蛋白质,
脂质,
核酸等物质甚多,因此在提取及鉴定等技术上比较复杂,文献中尚未见到有关这方面的报导。本文作者就家兔肺中之酸性粘多糖进行了研究。取家兔肺5斤,除去
支气管,与
干冰混合,在打碎机中打碎。分别用
丙酮及
乙醚去水及去脂,制成乾粉。取一定量乾粉,加入缓冲液,分别用
胰蛋白酶及
木瓜蛋白酶水解。
水解后
离心。溶液用
活性炭及Lloyd试剂处理后,加入
三氯醋酸以除去酶蛋白等。透析浓缩。于浓缩液中加入
氯化十六烷吡啶(简称CPC)以沉淀酸性粘多糖。离心,将沉淀溶于少量2．0M氯化钠溶液中,加入三体积之
甲醇,CPC即溶于甲醇中,而酸性粘多糖则沉出。沉淀用甲醇充分洗涤后,真空乾燥。取少量样品,用6N盐酸
水解,水解液经低压浓缩后进行氨基已糖之纸层析,结果纸层谱上出现
氨基半乳糖及氨基葡葡糖两点,说明家兔肺中至少含有两种酸性粘多糖。应用纸上
电泳法及CPC-
酸性粘多糖复合物之
MgCl2分段沉淀法初步证明家兔肺中之酸性粘多糖为
透明质酸及
硫酸软骨素。为了便于各成分的系统定量分析,...