锥虫蓝
活体染色剂
即台盼蓝。细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。
基本性质
中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝
分子式:C34H24N6O14S4Na4
分子量: 960.82
可溶于水(10mg/ml)
是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。
台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂
2机理
正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。
台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。
台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。
3步骤
步骤:(来自supergama)
1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品);
2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。
3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%)
4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。 1 e7 e* I* S) ^% X8 U$ K- _
5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。
6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%
4其他
保存条件
室温保存
说明
有潜在致癌危险
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
参考资料
最新修订时间:2023-12-24 18:03
目录
概述
基本性质
2机理
参考资料