限制性酶切图谱(restriction map) 又称DNA 的物理图谱，指某些限制酶的特异识别序列在DNA 链上的出现频率和它们之间的相对位置，表现出一些部位的线性序列，它是DNA分子结构特性的反映；图谱的大小和切点的距离根据DNA 片段的长短直接用碱基对(bp) 或千碱基对(kb)来表示。限制酶切图谱是从分子水平上探讨基因结构、核苷酸序列、基因表达调控等生物功能的基础，是分子克隆、生物进化研究、医学上遗传性疾病机制的研究和诊断等的有效工具。

制作DNA物理图谱的方法很多，一般同时用多种酶制作的图谱，用的酶种类多，制作的图谱比较完善、准确，参考价值大。对特定长度的DNA分子，先用两种限制酶分别切割，然后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳将限制酶酶切片段分开。这些片段的长度可由已知大小的标准DNA片段所构成的标记物(marker)来测定。