马相伯故居，位于中国上海市松江区泗泾镇开江中路354至358号，始建于明末清初，占地面积850平方米。

明末清初，马相伯故居始建。

清光绪八年（1882年），马相伯的胞兄、淮军将领马建勋去世后，其母亲沈氏将祖上遗留的田地房产均分给了马相伯和其弟马建忠。凡坐落在松江泗泾、青浦的地产、房屋，一应分给马相伯继承。

清光绪二十六年（1900年），马相伯将松江泗泾、青浦等地的3000亩良田和上海卢家湾、董家渡地产等全部捐出，作为创办“中西大学堂”的基金。

中华人民共和国成立之初，马相伯故居已经苍老残破，之后政府多次斥资修缮，并曾作为青少年活动基地的“少年之家”，其余部分房产移作民居。

2002年11月，马相伯故居由泗泾镇人民政府修复后对社会开放。

2011年6月，泗泾镇人民政府对马相伯故居进行大修改造。

2012年9月18日，马相伯故居开馆。

2020年，泗泾镇人民政府再次启动马相伯故居的修缮工程。

2021年6月26日，马相伯故居重新开馆，面向社会公众免费开放。

马相伯故居是五进四院一廊的传统院落式建筑，坐北面南，占地面积850平方米。

马相伯故居现存前厅、后厅，后厅四开间九界，南侧有弓形轩、船篷轩。宅东有穿弄，贯通前后厅。前厅梁架具有显著的时代特征，是研究明、清时期泗泾民居住宅的重要实物资料。

马相伯故居以五进为主要展示空间、四院为补充展示，并以江南元素和多样的展陈形式回顾了马相伯的一生。在展陈设计上，马相伯故居以时间为线索，通过少年求学、教育救国、抗日救国、著述成就四个篇章展示马相伯的爱国之心、强国之志、报国之行。

马相伯（1840年4月7日—1939年11月4日），原名建常，又名良，江苏丹阳人。 清同治九年（1870年）获神学博士学位，罗马教廷授予司铎职。清同治十一年（1871年）任徐汇公学校长。清光绪七年（1881年），出任清政府驻日本参赞，旋改任驻神户市、长崎市领事等职。清光绪九年（1883年）赴法国考察商务, 并旅居美国、欧洲，前后十多年投身于洋务运动。清光绪二十九年（1902年），马相伯发起创办震旦学院，因不宣传教理，教会竟派一神父来院主持教务，引导学生专习法文。学生大哗，要求集体退学。马相伯同情学生，当即率领学生离开震旦。清光绪三十一年（1904年）七月，马相伯创办复旦公学，被公推为校长。辛亥革命后，马相伯一度代理北京大学校长，后去职创办西山讲学社（辅仁大学前身）。九一八事变后， 马相伯积极投身抗日救亡运动，力主对内团结、一致抗日，民国二十一年（1932年），参加“中国民权保障同盟”。抗日战争爆发后，马相伯初移居桂林，后取道越南拟转赴昆明，行至谅山，病逝于旅寓。

马相伯故居是见证近现代高等教育的故居，也是研究明、清时期泗泾民居住宅的重要实物资料。

2013年6月8日，马相伯故居被公布为松江区文物保护单位。

2021年3月11日，马相伯故居入选上海市第一批革命文物名录。

2021年7月22日，马相伯故居被命名为松江区爱国主义教育基地。

马相伯故居位于中国上海市松江区泗泾镇开江中路354至358号，地处泗泾古镇中部。

马相伯故居开放时间为周二至周日每天08:30至11:00、13:00至16:30，16:00停止入场，每周一闭馆。

2021年6月26日起，马相伯故居面向社会公众免费开放。

截至2024年5月，途经马相伯故居的公交线路如下表所示。