1943年2月8日，高幸枝出生于父母皆是日本留学生的开明家庭，父母结婚后回到台湾，定居台北新店。家中经营碾米场和西药房，家境小康，上有一个哥哥，下有一个妹妹，因为母亲是南部西螺人，因此家里习惯用台语沟通。
1962年，仍于台北艺专就读的高幸枝，投考中央电影公司，同期或前後期有
王莫愁、
归亚蕾、
勾峰等知名演员。之后多参与
台语电影演出，毕业后，亦从事台语电影之演员工作。
1964年，高幸枝首度担纲主演
台语片《恩重如山》（知名摄影
廖万文之作品），演出老师一职，因科班表演技巧，被归於实力派演员。同年，
台语片迅速没落，她也参与国语片，其中担任女配角的《
蚵女》（台湾首部彩色
电影）一片，于亚太影展打败《梁山伯与祝英台》，获得最佳影片。
高幸枝真正让台湾观众熟悉的，是电视剧演出。1972年以现场同步方式播出，由台湾西螺少林武术传承的真实故事改编的中华电视公司连续剧《西螺七剑》，是她所主演戏剧中，最为人熟悉的电视剧。该出连演222集的连续剧中，在戏中演出「四崁」（施秋莲）的高幸枝，亦与剧中主角之一「阿善师」刘林成为夫妻。据闻这段婚姻因为
刘林的一段外遇，高幸枝和刘林10多年不讲话，至她去世死亡前两天，才把自己签好的那份离婚同意书给了刘林。[1]
虽然因为外型关系，高幸枝并无主演甚多影片，但饰演了许多如慈母或坏婆婆的配角角色，为台湾
台语电视剧常见的熟面孔。除此，她也偶尔参与如：国语
电影《小毕的故事》的演出。之後，她尝试参与电视幕後工作，2002年制作之
台语连续剧《素心兰》为其代表作。
2006年6月26日，尚於
大爱电视台参与连续剧演出的高幸枝因肾脏癌肿瘤破裂过世，享年63岁。