高效液相色谱方法是在经典液相柱色谱(即以液体作流动相的柱色谱法)的基础上发展起来的一种新的色谱分析方法。由于它采用了平均粒径为3～10μm且分布窄的高效固定相，因而获得每米达数千甚至上万块理论塔板的分离能力。为了获得较高的流速(1～2ml/min)，流动相必须用高压泵输送，因此又叫高压液相色谱法。按照固定相的聚集状态可分为液—固色谱法和液—液色谱法;按分离的机理可分为吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱法和空间排斥色谱法;按照两相的相对极性的大小又有正相色谱法和反相色谱法之别。

应用最广泛的是以键合硅胶为固定相、以甲醇—水或乙腈—水为流动相的反相高效液相色谱法。常用的检测器有折光检测器、紫外一可见分光光度检测器、荧光检测器、电导检测器等。与气相色谱法相比，它的主要优点是可以在较低的温度下操作，除气体和挥发性液体物质以外，所有可溶于溶剂中的化合物均可作为液相色谱的样品，尤其对那些不适于气相色谱分析的热不稳定性物质、离子性物质和高分子量物质的分析更有实际意义。在工业原料、农药、染料、维生素、氨基酸、核酸、药品、天然有机物、生物样品、生物体代谢物、血液和血清、合成高分子等样品的分析中得到了广泛的应用。