VDRL,性病研究实验室实验(venereal disease research laboratory test)的英文缩写,是检测
梅毒螺旋体的一种方法。
实验介绍
美国Pangborn等发现一种性病研究实验室抗原(VDRL),是从牛心肌中提取的
心磷脂,适量加入
胆固醇及卵磷脂以提高敏感性,通常称这种抗原为心拟脂抗原。VDRL试验属于微量玻片法,是唯一推荐用于检测脑脊液反应素的试验,对诊断神经梅毒具有重要价值,可作定量及定 性试验,操作简单,试剂及对照血清已标准化,费用低。但对
一期梅毒敏感性不高。
抗原血清试验
梅毒螺旋体一旦感染人体,人体迅速对被损害的
宿主细胞以及梅毒螺旋体
细胞表面所释放的类脂物
质作出免疫应答,在3~4 周产生抗类脂抗原的
抗体(
反应素)。这些抗体主要是IgG 和IgM 型混合
抗体。非
梅毒螺旋体抗原试验是使用心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原的絮状凝集试验。反应素与
心磷脂形成
抗原抗体反应,卵磷脂可加强心磷脂的抗原性,胆固醇可增强抗原的敏感性。心磷脂、
卵磷脂遇水形成胶体溶液,胆固醇遇水形成结晶。当抗原与抗体(反应素)混合发生反应时,后者
即粘附胶体微粒的周围,形成疏水性薄膜。由于摇动、碰撞,使颗粒与颗粒互相粘附而形成肉眼可
见的颗粒凝集和沉淀,即为阳性反应。如遇到非梅毒血清,因体液中的白蛋白多于球蛋白,而白蛋
白对胶体颗粒有保护作用,形成亲水性薄膜,即使同样摇动、碰撞,由于抗原颗粒周围没有粘附免
疫球蛋白的作用,不能形成较大颗粒,无肉眼可见的凝集和沉淀,因此为阴性反应。VDRL、USR、
RPR 和TRUST 等试验均为此类试验,它们所采用的抗原成分相同,
敏感性和
特异性基本相似。
VDRL玻片试验
1.材料:a. VDRL 试剂盒:含VDRL 抗原(0.5mL);VDRL 缓冲液,pH6.0±0.1,其配方为中性福尔马林0.5 mL,
Na2HPO4 0.037g,KH2PO4 0.17g,NaCl 10.0g,蒸馏水1000mL;标准针头(60±1 滴/mL),直径14mm
漆圈玻片;VDRL 试验结果图片。
b. 其他:0.85% NaCl 溶液(
等渗盐水);可调水平旋转器。
B1.2.2 VDRL 抗原配制方法:
a. 吸取0.3mL VDRL 缓冲液置30mL 小瓶;
b. 吸取0.3mL VDRL 抗原迅速滴入小瓶内VDRL 缓冲液中(约4 秒钟),随后摇动10 秒钟,使之混
匀;
c. 立即加2.4mL VDRL 缓冲液,盖上瓶盖,来回颠倒摇动小瓶10 秒钟约30 次,即为VDRL 抗原,
此抗原只能用1 天。
定性试验
a. 血清标本需 56℃灭活30 分钟备用;
b. 吸取 0.05mL 血清放入玻片圈内,将血清涂开至整个圈内;
c. 用标准针头加入 1 滴抗原;
d. 将玻片置旋转器上摇动 4 min,180±5 次/min,立即置10×10 倍显微镜下观察。
定量试验
经 VDRL 定性试验为阳性、弱阳性,可疑反应或阴性但临床怀疑为梅毒者,需做定量试验,前
者需明确抗体滴度,后者为排除“前带现象”。
a. 在反应板 1~8 孔各加等渗盐水0.05 mL;
b. 吸取 0.05 mL 血清标本(血清已灭活)置第1 孔与等渗盐水混匀,吸取0.05 mL 稀释液至第2 孔
混匀,再吸取0.05 mL 至第3 孔,如此连续稀释至第8 孔,弃0.05 mL 稀释液。稀释度为原倍、1:2、
1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128,必要时可稀释至更高倍数。
c. 每个稀释度加入抗原 1 滴;
d. 旋转速度和时间同定性试验。
A2.1.2.5结果
大或中等大小的絮状物,液体清亮: 3+~4+ 强阳性反应;
絮状物较小,液体较清亮: 2+ 阳性反应;
絮状物较小,均匀分布,液体混浊 1+ 弱阳性反应;
抗原颗粒稍粗,无凝集 ± 可疑;
抗原颗粒均匀,针状细小: – 阴性反应。