中耳位于颞骨岩部内，包括鼓膜内侧的鼓室和鼓膜上方的鼓室上隐窝。前方借咽鼓管通咽腔，后上方借乳突窦口通乳突小房，鼓室内覆黏膜，与咽鼓管、乳突小房黏膜相续。中耳内容如下：听小骨：锤骨、砧骨和镫骨；镫骨肌和鼓膜张肌；鼓索神经（面神经的分支）；鼓膜神经丛。科学家揭示人类中耳曾是鱼类的鳃。

鼓室呈棱形或狭长的盒子状，边缘凹陷，有一底、一顶和四壁。

顶是一层薄的骨板即鼓室盖，鼓室盖分隔颅中窝的硬脑膜和鼓室；底（颈静脉壁）是一层薄的骨板，分隔鼓室与颈内静脉上球；外侧（膜）壁几乎全部由凹陷的鼓膜形成，上部是鼓室上隐窝的骨板，鼓膜包绕锤骨柄，锤骨头位于鼓室上隐窝内；内侧（迷路）壁分隔中耳和内耳，可见耳蜗基部形成的突起；前壁（颈动脉壁）分隔鼓室和颈动脉管，其上部是咽鼓管及鼓膜张肌管开口；后壁（乳突壁）上部有乳突窦口通乳突小房，联系鼓室和乳突，面神经管在乳突窦口内侧，乳突小房与鼓室后壁间下降。

乳突窦位于颞骨乳突内，和鼓室一样，顶部与颅中窝之间以鼓室盖分隔，底部借小孔通乳突小房。乳突窦和乳突小房内覆黏膜，与中耳黏膜相续，乳突窦前邻面神经管。

咽鼓管连接鼓室和鼻咽腔，向后下开口于鼻腔下鼻道，其后外1/3为骨性，其余部分为软骨性。咽鼓管内覆黏膜，向后与鼓室黏膜相续，向前与鼻咽部黏膜相续。

空气可经咽鼓管自由出入鼓室，平衡鼓室和外界的气压，保证鼓膜自由运动。正常情况下软骨性支架形成的咽鼓管壁贴附在一起，所以须在腭帆提肌收缩牵拉咽鼓管一侧，腭帆张肌收缩牵拉咽鼓管另一侧时，才使咽鼓管主动开放。这些都是软腭的肌肉，因此常用打哈欠及吞咽等动作来平衡鼓膜两侧气压。

咽升动脉（颈外动脉分支之一）、脑膜中动脉和上颌动脉的分支翼管动脉分布于咽鼓管。面神经和舌咽神经形成的鼓膜神经丛发出分支分布于咽鼓管，来自翼腭神经节的神经纤维也支配咽鼓管。

鼓室内的听小骨形成从鼓膜到卵圆窗的听骨链，卵圆窗是位于鼓室内壁上的椭圆形开口，由镫骨底封闭，内连内耳骨迷路。听小骨在发育过程中最早骨化，出生时已完全成熟，听小骨坚硬致密。锤骨附在鼓膜上，镫骨附在卵圆窗上，两骨之间是砧骨，分别与它们形成关节。听小骨与其他骨不同的是，外覆鼓室黏膜，而不是骨膜。

锤骨头为圆形，位于鼓室上隐窝，颈位于鼓膜松弛部下面，柄被鼓膜包绕，柄尖位于鼓膜脐处，并随之一起运动。锤骨头与砧骨关节，鼓膜张肌腱在锤骨头附近插入锤骨柄，鼓索神经跨过锤骨颈内表面，锤骨通过长的突起和附在鼓膜上的柄发挥杠杆作用。

砧骨体较大，位于鼓室上隐窝内，与锤骨头相关节，长脚与锤骨柄平行，内侧端通过突向外侧的豆状突与镫骨相关节，砧骨短脚通过韧带附在鼓室后壁。

镫骨是最小的听小骨，镫骨头通过前后脚连到镫骨底，后者贴附于鼓室内壁的卵圆窗上。镫骨底面积远小于鼓膜面积，通过这一过程，振动的力量被放大10倍以上，因此，听小骨的作用是放大鼓膜传递声波的振动力量，降低振幅。