抗体滴度用来衡量某种抗体(antibody)识别特定
抗原表位(epitope)所需要的
最低浓度(也即最大
稀释度)。一般表示为:仍能产生
阳性结果的最大稀释度。通常通过
ELISA方法来检测抗体
滴度。
打个比方,通过间接库姆伯斯试验(indirect Coombs test)检测一个孕妇血清中anti-Rh 抗体。一个患者可能报告通过此试验检出的抗体滴度为16,这表示只要血清的
稀释度不超过1/16(1份比例的血清和15份比例的
稀释液),此试验都能得到
阳性结果,即可识别出抗原。如果稀释度超过1/16,则检出的结果皆为阴性,即抗体无法识别抗原。还有
可能发生的情况是,几周过后,同样一位患者可能检测出抗体滴度达到32(1份比例的血清和31份比例的稀释液)。这可能是因为孕妇体内产生了更多的anti-Rh 抗体,以至于即使更高的稀释度也能得到阳性结果。
方法 采用脂质体转染法 ,以
重组质粒转染
COS7细胞 ,通过抗性标志筛选
稳定转染入质粒的细胞 ,RT PCR和Westernblot检测被转染细胞OmpL1基因的表达情况。然后 ,将重组质粒以肌注法免疫BALB c小鼠 ,每 2周 1次 ,共 3次 ,
ELISA检测小鼠的
体液免疫应答水平。结果 RT PCR结果显示 ,重组质粒转染组在约 1kb处出现特异的扩增带 ;Westernblot检测显示 ,重组质粒转染组
总蛋白样品在
相对分子质量 (Mr)为 33.5× 10 3 处出现特异的蛋白带 ,而空
质粒载体转染组均没有此相应的
DNA或
蛋白质条带。两质粒第 2次免疫小鼠 2周后 ,10 0
μg重组质粒pBC OmpL1和pcDNA3 OmpL1DNA免疫组产生了
效价为 1 196 83的高
滴度抗体 ,注射 5 0 μgpcDNA3 OmpL1+5 0 μgpcDNA3的小鼠产生滴度为 1 6 5 6 1较高的抗...
来源文章摘要:编码
结核杆菌3种抗原Ag85B、MPT64、MPT83的
基因片段插入
真核表达载体作为组合
疫苗免疫小鼠,DDA和MPL作为
佐剂分别提高了此三价苗的
免疫原性和免疫保护效果,且相比之下DDA优于MPL.添加DDA后,Ag85B、MPT64、MPT83抗原特异的IFN-γ含量分别为(265.37± 79.2)U/ml,(185.31±58.3)U/ml,(108.13±54.4)U/ml,分别比非佐剂组的高16U/ml,45U/ml和 2U/ml,与MPL组3种
抗原特异性IFN-γ的含量无
显著差异.
IL-4的含量在各组中无显著差异.攻毒后细菌计数结果显示,添加
佐剂的三价苗组小鼠的
肺脏和脾脏的载菌量分别比空载体组降低了2 ̄3个
数量级,且佐剂DDA组显著优于佐剂MPL组和未加佐剂组.
病理切片结果与载菌量数据相一致,添加佐剂组,特别是DDA组小鼠肺部
淋巴细胞相对减少,
巨噬细胞增多.因此,DDA作为佐剂能显著提高
核酸疫苗的免疫效率,佐剂MPL不能提高结核杆菌多价核酸疫苗的免疫效率。