配位体是配位化合物（或络合物）中的中心元素相结合的阴离子或中性分子，如含有孤对电子的卤素元素、氨。用铵根离子(NH+4)来说明的话，氨（NH3）和氢离子（H+）配位；氨是配位体。总体来说配位体是提供电子，并和中心原子（提供空轨道）通过配位键结合而形成配位化合物。

作为配位体，应满足以下几个条件：

①它所形成的配合物应能溶于水，即要以离子形式存在于溶液中；

②配位体不干扰阳极和阴极的氧化一还原反应，在溶液中不分解和水解；

③所形成的配离子要有一定的稳定性和超电压。

配位体的种类很多，主要分为无机和有机两大类。无机配体的数量比较少，结构也比较简单。有机配体的数量繁多，结构复杂。虽然其配位能力可以从配位原子的性质来推断，但是，它的结构因素往往也起重大作用，如共轭兀键的作用，螯合作用，空间位阻以及取代基的影响等。

1．生物特效配位体

许多生物大分子或小分子都可作为生物特效配位体，如：

①核碱、核苷、核苷酸、寡聚核苷酸、核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)；

②氨基酸、多肽、蛋白质、酶；

③辅酶，即由维生素PP(烟酸和烟酸胺)或B族维生素与核苷酸、金属离子组成，如辅酶I [Co I，又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)]；

④外源凝集素(可从扁豆、小麦胚、蓖麻中提取)；

⑤糖类[包括单糖、寡糖、多糖(如肝素)]；

⑥抗原和抗体；

⑦亲和素-生物素；

⑧激素；

⑨生物细胞、生物分子组合体和微生物。

上述配位体都具有特效的生物亲和识别功能，可与互补的生物分子偶合成锁匙络合物。

2．染料配位体

利用一些合成染料分子具有与核苷酸相似的化学结构，作为生物模拟配位体。现已获得广泛应用的为蒽醌活性三嗪染料，如汽巴蓝F3G-A，萘活性三嗪染料，如布洛欣红HE-3B以及氟代均三嗪染料汽巴黄F3R等，此类配位体价廉易得，已用于制备型亲和色谱。

3．定位金属离子配位体

许多有机螯合剂，如亚氨基二乙酸(IDA)、亚乙基二胺四乙酸、咪唑、硫脲、8-羟基喹啉、双硫腙等，都可与金属离子，如Cu2+、Zn2+、Ni2+、Mg2+、Fe3+等生成稳定的螯合物，这些螯合物呈现出对蛋白质、酶的特效亲和性，从而在亲和色谱中也获得越来越多的应用。

4．包合配合物配位体

以β-环糊精(β-CD)为主体，利用它具有的特殊空穴结构，与客体生物分子形成主一客体包合配合物。此外冠醚、穴醚、杯芳烃也可作为模拟酶，与生物分子形成包合配合物，它们都已用于亲和色谱的分离和分析。

5．电荷转移配位体

电荷转移配位体可以是电子给予体，如5，10，15，20-四(对羟基苯基)卟啉，或电子接受体，如磺酰化酞菁铜，利用它们与互补生物分子问的正、负电荷吸引力的亲和作用，而实现对生物分子的分离。

6．共价配位体

利用具有二硫桥键(-S-S-)的吡啶二硫化物与小肽(谷胱甘肽)偶联作为配位体，可用于分离含硫蛋白质，这是一种特殊的生物选择性亲和作用。

对含有多个活性作用位的配位体，它与偶联间隔臂载体的键合，可能有几种不同的连接方式来生成亲和固定相，这会直接影响配位体周围的立体环境，并进而会产生对同一种配位体，因与载体连接方式的差异，对生物大分子呈现截然不同的选择性。

如一磷酸腺苷AMP和二磷酸腺苷ADP与偶联氨己基或己酰肼的琼脂糖制备的亲和固定相，可有四种连接方式，如图1所示。图中(a)N-(6-氨己基)-AMP-琼脂糖[N-AMP]，(b)C-(6-氨己基)-AMP-琼脂糖[C-AMP]，(c)P-(6-氨己基)-P-(5'-腺苷)-焦磷酸-琼脂糖[P-ADP]，(d)核糖基连接的AMP[R-AMP]。

由上述实例可看到，当选用的配位体有几个可与间隔臂偶联的活性作用点，并且生物大分子与配位体的结合方式并不清楚的情况下，最好合成几种亲和固定相，以便评价它们与生物大分子的亲和结合的效能。对有两个或多个连接作用点的配位体，应选择对化学衍生相对敏感的作用点。如对上述AMP衍生物，由于8位(C)取代配位体的制备程序相对简便并节省原料，而6位N(N)或磷酸(P)取代衍生物的合成路线复杂，并需专门的有机合成训练，因而从制备可行性考虑，多采用8位取代的方案。一般认为配位体分子愈大，它与互补生物大分子的活性作用点越多，制备亲和固定相可选用的合成路线自由度也越大。

亲合色谱中的吸附/解附

亲合色谱吸附的基础是生物特异性吸附，或者是蛋白质与具有一定结构的配位体反应。吸附作用不是一般的色谱作用，它是在低盐或高盐宽的pH范围内进行吸附。配位密度对保留特性和柱容量的影响不同于其它色谱运行机理，解附的完成是依靠加入在流动相中的配位体、改变pH范围、变化离子强度来完成的。特异性置换剂是亲合色谱中比较理想的解附剂。它能解附配位体和生物大分子之间的结合点。一般在解附过程中，蛋白质由于结构受到破坏，而使回收率降低。

免疫亲合色谱，由于它能在分离纯化过程中使生物活性物质保持不变，因此，得到广泛的应用。特别是用单克隆抗体作为配位体的应用更广。免疫亲合色谱在工业上纯化干扰素等方面取得了比较满意的结果。