醋酸丙氨瑞林是一种化学物质,为白色或类白色粉末;无臭,有引湿性本品在水中溶解,在
甲醇中略溶,在1%醋酸溶液中溶解比旋度取本品,精密称定,加1%醋酸溶液溶解并定量稀释成每1ml中含5mg的溶液,依法测定(附录Ⅵ E),按无水、无醋酸物计算,比旋度为-46°至-56°。
吸收系数 取本品,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液,照紫外-可见
分光光度法(附录ⅣA),在279nm的波长处测定吸光度,按无水、无醋酸物计算,吸收系数(E 1%/1cm)为52-57。
(1)在含量测定项下记录的色谱图中,供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 (2)取本品与醋酸丙氨瑞林对照品,分别加水制成每1ml中约含2mg的溶液,照薄层色谱法(附录 B)试验,吸取上述两种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸-水(60:45:6:14)为展开剂,展开,晾干,熏氯气(在一容器底部,放一烧杯,加入5%高锰酸钾溶液10ml,再加盐酸3ml,密闭),晾干,再喷以碘化钾淀粉指示液使显色,供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶液的斑点相同。
溶液的澄清度与颜色 取本品20mg,加水2ml溶解后,溶液应澄清无色;如显色,与黄色2号
标准比色液(附录Ⅸ A)比较,不得更深。 醋酸 取本品适量,精密称定,加稀释液〔流动相A-流动相B(95:5)〕溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液,作为供试品溶液;另取冰醋酸适量,精密称定,加稀释液稀释制成每1ml中约含0.60mg的溶液,作为对照品溶液。照
高效液相色谱治(附录Ⅴ D)测定,用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以磷酸溶液(取磷酸0.7ml,加水1000ml,用氢氧化钠试液调节pH值至3.0)为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,检测波长为210nm。理论板数按醋酸峰计算,不低于2000。梯度洗脱程序如下: 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 95 5 5 50 50 20 50 50 25 95 5 精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl,分别注入
液相色谱仪,记录色谱图,按外标法以峰面积计算。含醋酸不得过7.5%。 氨基酸比值 取本品,加6mol/L盐酸溶液,于110℃水解24小时后,用氨基酸分析仪式适宜的
高效液相色谱仪测定,供试品中各氨基酸与丙氨酸摩尔比应符合以下规定:丝氨酸为0.7-1.0,谷氨酸为0.9-1.1,脯氨酸为0.8-1.0,亮氨酸为0.9-1.1,酪氨酸为0.9-1.1,组氨酸为0.9-1.1,精氨酸为0.9-1.1。 有关物质 取本品,加水制成每1ml中含0.5mg的溶液,作为供试品溶液;精密量取1ml,置100ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件,取对照溶液20μl注入液相色谱仪,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰高约为满量程的50%;精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍,供试品溶液的色谱图中,除溶剂峰外,单个杂质峰面积不得大于对照溶液峰面积的2倍.各杂质峰面积的和不得大于对照溶液峰面积的5倍(任何小于对照溶液主成分峰面积0.05倍的峰可忽略不计)。 水分 取本品,依法测定(附录Ⅷ M第一法A)。含水分不得过7.0%。
照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至 3.0)-乙腈(80:20)为流动相;检测波长为220nm。理论板数按醋酸丙氨瑞林峰计算不低于2000。 测定法 取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液,精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取醋酸丙氨瑞林对照品,同法测定.按外标法以峰面积计算,即得。
供试品用流动相溶解并稀释成一定浓度的溶液,进入
高效液相色谱仪进行色谱分离,用
紫外吸收检测器,于波长220nm处检测醋酸丙氨瑞林的吸收值,计算出其含量。
1. 乙腈(色谱纯)
2. 水(色谱纯)
3. 磷酸溶液:0.01mol/L
4. 三乙胺
1. 仪器
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论板数按醋酸丙氨瑞林计算应不低于 2000。
2. 色谱条件
1. 对照品溶液的制备
2. 供试品溶液的制备
本品为5-氧代脯氨酰-组氨酰-色氨酰-丝氨酰-酪氨酰-D-内氨酰-亮氨酰-精氨酰-脯氨酰-乙胺的醋酸盐。按无水、无醋酸物计算,含C56H78N18O12应为95.0%-103.0%