鲁米诺反应又叫氨基苯二酰-肼反应，是一钟用鲁米诺鉴别经过擦洗，时间很久的血痕的方法。生物学上则使用鲁米诺来检测细胞中的铜、铁及氰化物的存在。

鲁米诺在1853年被合成出来。1928年，化学家首次发现这种化合物有一个奇妙的特性，当它被氧化时能发出蓝光。几年以后，就有人想到利用这种特性去检测血迹。血液中含有血红蛋白，我们从空气中吸入的氧气就是靠这种蛋白质输送到全身各部分的。血红蛋白含有铁，而铁能催化过氧化氢的分解，让过氧化氢变成水和单氧，单氧再氧化鲁米诺让它发光。在检验血痕时，血红素（hemoglobin，血红蛋白中负责运输氧的一种蛋白质）催化鲁米诺与过氧化氢发生反应，显出蓝绿色的荧光。这种检测方法极为灵敏，能检测只有百万分之一含量的血，即使滴一小滴血到一大缸水中也能被检测出来，由此可知犯罪分子是多么难以把现场清洗干净了。

3-硝基邻苯二甲酸可作为鲁米诺的合成原料。3-硝基邻苯二甲酸与肼在高沸点溶剂（如二甘醇）中发生缩合反应，失去一分子水，生成3-硝基邻苯二甲酰肼。然后以保险粉还原3-硝基邻苯二甲酰肼中的硝基，得到3-氨基邻苯二甲酰肼，即是鲁米诺。

鲁米诺只有用氧化剂处理过才会发光。通常使用双氧水和一种氢氧化物碱的混合水溶液作为激发剂。在铁化合物催化下，双氧水分解为氧气和水：

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实验室中常以铁氰化钾作为催化剂铁的来源，而法医学上的催化剂则恰好是血红蛋白中的铁。很多生物系统中的酶也可催化过氧化氢的分解反应。

鲁米诺与氢氧化物反应时生成了一个双负离子（Dianion），它可被过氧化氢分解出的氧气氧化，产物为一个有机过氧化物。该过氧化物很不稳定，立即分解出氧气，生成激发态的3-氨基邻苯二甲酸。激发态至基态转化中，释放的能量以光子的形式存在，波长位于可见光的蓝光部分。1滴血混在999滴水中时也可以被检验出来。不过它与其他具有氧化性的物质也发生反应，但是显示的颜色和显色的时间长短都是不同的。

即使犯罪现场的血迹已经被擦过或清除过，调查者依旧可以使用鲁米诺找到它们的位置。实际上，调查者在要调查的区域内喷洒鲁米诺和激发剂溶液，血中的铁立即催化鲁米诺的发光反应，使其产生蓝色光芒。该反应需用的催化剂量非常少，因此鲁米诺可以检测痕量的血迹。发光大约持续30秒，可通过长曝光的照片观察出，其周围环境不可以太亮。

1.鲁米诺在铜、含铜合金或某些漂白剂的存在下发出荧光，会强烈掩盖血迹的存在。

2.鲁米诺可以检测出动物血及尿中的少量血，因此如果检测房间中含有尿或动物血，检测结果会有偏差。

3.鲁米诺与排泄物反应，发出的光与和血反应发出的是相同的。

4.鲁米诺可能干扰其他检测，然而鲁米诺并不干扰DNA的提取。

通常采取以下几种办法避免检验受到干扰：

1.让现场干燥几天，漂白剂的干扰作用就会消失，而血迹即使过了许多年，还能让鲁米诺发光。

2.使用某种能抑制次氯酸的干扰作用的化合物。很显然不能使用抗氧化剂，因为那会把血迹与鲁米诺的反应也抑制住了。人们针对次氯酸的化学结构，例如针对它含有的氯原子，找到了合适的抑制物。最保险的办法是在用鲁米诺发光法检测到疑似血迹的物质后，用别的方法确定那的确是血迹。

而且，人们发现，血迹在被鲁米诺处理过以后，它含有的遗传物质DNA并没有被破坏掉，还能从中提取出来做鉴定。

在刑侦学中的鲁米诺反应，通俗点讲就是在凶案现场只要有血液溅出并沾到任何物体上，不管事后经过何种方式的清除，只要用鲁米诺试剂喷洒在其上并在暗环境下观察的话，原沾有血迹的地方就会有因发生荧光反应而呈蓝白色的荧光。盐酸可以，只是因为有血迹分子，将它们反应掉就可以了，但是会留下反应的痕迹。

2024年5月，黑龙江齐齐哈尔一所中学通过化学实验完美复刻了“蓝眼泪”——该校两名学生将两种溶液倒进一个连着漏斗、长管的烧瓶后，溶液产生化学反应发出蓝色荧光。

实验原理：化学实验使用了过氧化氢、高铁酸钾、氢氧化钠、鲁米诺四种试剂，过氧化氢和高铁酸钾混合放入一个烧杯，氢氧化钠和鲁米诺混合放入另一个烧杯，随后由一名男生和一名女生分别拿着装有不同溶液的烧杯，缓缓将溶液注入漏斗，现场就出现了惊艳的“蓝眼泪”效果。