TE缓冲液
化学试剂
TE缓冲液是由TrisEDTA配制而成,主要用于溶解核酸,能稳定储存DNARNA。TE缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。
三羟甲基氨基甲烷
它可以和重金属一起作用,但在有些系统中也起抑止的作用。其主要缺点是温度效应,这点往往被忽视。在室温pH是7.8的Tris一缓冲液,在4℃时是8.4,在37℃时是7.4,因此,4℃配制的缓冲液拿到37℃测量时,其氢离子浓度就增加了10倍。而且它在pH7.5以下,缓冲能力差。
配制
1×TE Buffer
组成浓度:10mMTris-HCl1mM EDTA PH=8.0
配制量:500ml
配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中
1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml
0.5M EDTA PH=8.0 1ml
向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.
作用及用途
作用
TE缓冲液是弱碱性,对DNA的碱基有保护性,(DNA在TE中的稳定性较好,不易被破坏其完整性或产生开环及断裂),包括提取好的DNA也要放在TE缓冲液中保存.
用途
TE缓冲液Tris +EDTA缓冲液,这种缓冲液我们一般用作溶解剂或保持剂,主要是调控PHTAE是一种电泳缓冲液,主要用于DNA分子的电泳。 TE组成浓度:10mM Tris-HCl 1mM EDTA PH=8.0 配制量:500ml 配制方法:量取下列溶液于500ml烧杯中 1M Tris-HCl Buffer PH=8.0 5ml 0.5M EDTA PH=8.0 1ml 向烧杯中加入约400mldd H2O均匀混合;将溶液定容到500ml后,高温高压灭菌;室温保存.
TAE是使用最广泛的缓冲系统。其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量(TBE中电泳时测出的相对分子质量会大于实际分子质量),且双链线状DNA在其中的迁移率较其他两种缓冲液快约10%,电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果,此外,回收DNA片段时也易用TAE缓冲系统进行电泳。TAE的缺点是缓冲容量小,长时间电泳(如过夜)不可选用,除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换。 50×TAE Buffer 配制方法: 1. 称量Tris 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中; 2.向烧杯中加入约800ml去离子水,充分搅拌均匀; 3加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解; 4.加去离子水定容至1L后,室温保存。
参考资料
最新修订时间:2024-11-07 15:34
目录
概述
三羟甲基氨基甲烷
配制
参考资料