TaqMan
荧光探针是一种
寡核苷酸探针,其5’末端携带荧光基团,如FAM、TET、VIC、HEX等,3’端携带淬灭基团,如TAMRA、BHQ等。
PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被
淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'
外切酶活性将探针
酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个
荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。
TaqMan探针法
荧光定量PCR适用于病原体检测,疾病耐药基因研究,药物疗效考核,遗传疾病的诊断。新型的TaqMan-MGB探针还用于分析
基因突变(
SNP),有望成为
基因诊断和
个体化用药分析的首选技术平台。