是雅各的儿子利未的后代，属以色列十二支派之一，专责协助祭司进行宗教仪式，并管理会幕或圣殿内的一切事务。利未支派是一个享受神特别恩召的人，充满了许多神秘的色彩。因为在旧约，外人，就是在祭司、利未人以外的人无法接近帐幕，因为近前来的外人必被治死，然而，利未人却可以管法柜的帐幕和其的器具、办理帐幕的事，在帐幕的四围安营。这相对以色列全支派而言，无疑是蒙了特别的恩宠与呼召的。神选派利未人去事奉他，因为利未人的祖先与摩西一起反对百姓拜偶像金牛犊（出埃及记32:26-27）。

亚伦及其子孙专任祭司职，世袭不移。但会幕中礼仪繁多，非少数人所能胜任，利未人遂被选出督理圣所之事。其日常职务是迁营时搬运会幕及其中器物，安营时则搭盖帐幕，并帮助祭司行事（民1:50-53；3:6-9；撒上6:15；撒下15:24）。年满30岁可参加搬运会幕（民4:3），25岁则辅佐祭司为助理（民8:24）。亚伦的子孙既是利未人又兼祭司，故常包含在利未人一语中（申33:8-10；书14:3；21:1，4等）。他们本来没有数在以色列人中，因为在以色列人中，没有分给他们产业。但却被主拣选，成为主所重用的器皿。利未人是神分别为圣服侍圣殿和祭司的，他们所献上的十分之一是归给祭司所有的。

划分迦南地时，利未人散居各地（书21:20-40）。分给充任祭司之利未人的诸邑，皆在犹大、西缅及便雅悯界内；其余利未人城邑共35座，散布在东部和北部各支派之地（书21:5-7）。大卫在位时，利未人分为四部分：一是圣所中辅佐祭司供役的助手；二是士师及修缮人员；三是守门人；四是乐工。每部分（或除第二部分外）又分24班，轮替供职（代上15:16-24；24:1-19；代下19:8-11；30:16，17；拉6:18；尼13:5）。王国分裂后，多数利未人离开北方王国而移居犹大及耶路撒冷（代下11:13-15）。