瞬时表达,即
瞬时转染后的初期,
质粒或
DNA片段是游离在细胞中的,能够进行表达,称为瞬时转染表达。随后,游离在细胞中的质粒或DNA片段有两种归化,一种是被降解,还有一种是插入染色体中而能够持续地稳定地表达。
当
外源基因导入植物细胞中以后,其
表达方式有瞬时表达(transient expression)和稳定表达(stable expression)两种。在瞬时表达状态的
基因转移中,引入细胞的
外源DNA和
宿主细胞染色体DNA并不发生整合。这些
DNA一般随载体进入细胞后12小时内就可以表达,并持续约80小时左右。在稳定表达状态的基因转移中,导入宿主细胞的
DNA整合到细胞染色体DNA上,以永久形式存在,并可传给后代,形成稳定的
转化细胞。
基因的导入方法可分为间接
转基因方法和直接转基因方法。
植物瞬时表达系统在
启动子分析、
基因功能分析和生产
重组蛋白方面用途广泛。并且具有如下优点:①简单快速。
转化基因可在转化的一周内进行分析,避免了
组织培养等繁杂过程;②表达水平高。当单链的
T-DNA进入
植物细胞后,许多未整合到植物
基因组中的游离
外源基因同样可以表达。③安全有效。不受植物
生长发育过程的影响,不产生可遗传的后代,结果可靠直观,不存在
基因漂移的风险。常用
基因枪转化和
农杆菌真空渗透法