瞬时转染(transient transfection)是将
DNA导入
真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,
重组DNA导入
感染性强的
细胞系以获得
目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比
稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对
溶解产物中目的基因的表达进行检测。
瞬时转染(transient transfection)是将
DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。
第一,操作简易和周期短。传统的稳定转化系统,从转化到获得转基因
植株至少需要几个月甚至更长的时间,且
转化效率比较低,
瞬时表达系统仅需要2~4 周,避免了繁琐的
植物组织培养过程(Kapila et al., 1997);
第二,表达效率高。当单链的
T-DNA 进入
植物细胞后,不但转化到植物
基因组中的基因可以表达,许多未整合到植物基因组中的游离
外源基因同样可以表达,
拷贝数更高。其表达不受基因位置和
基因沉默的影响,因而表达效率更高,可达稳定转化表达量的数倍(Janssenand
Gardner, 1990; Kapila et al., 1997; Yang et al.,2000; Wroblewski et al., 2005);
第三,安全高效。
稳定表达的
转基因植物存在
食物链污染,
花粉传播引起的
基因漂移等转基因
安全问题(Twyan et al., 2003),瞬时表达中的
基因转移及其表达是一个独立的过程,不产生可遗传的后代,其
生物安全性要高的多,且试验结果更为直观可靠;
第四,不需要筛选基因。稳定的
转基因转化通常需要抗生素或其他筛选基因进行初步筛选,其转基因植株也相对存在着转基因安全问题,瞬时表达无需筛选基因,减少了转基因中抗生素等带来的
不安全因素,同时载体可以更小,更容易转化较大的目的片段和多个基因;