1995年，蔡祥宇出生在中国的石油城大庆，她从小就很喜欢表演，喜欢模仿电视剧中的人物。2001年，6岁的她开始学习舞蹈，初中时考入艺校，主攻民族舞和芭蕾舞，上学后，她一直是班级里的文艺骨干。中学毕业后，考入郑州航空工业管理学院。在校期间，她还多次参与了平面广告的拍摄。
2017年，主演网络剧情电影《
魔鬼的交易》，从而步入演艺圈；10月，主演古装爱情美食电影《
龙的厨房》，在片中她一人分饰两角，分别饰演人气美食直播主播严佳人和明朝严嵩的侄女严珍；此外，她还参演了姚远、
曾梦雪主演的爱情喜剧《
嗨！前任》，在剧中饰演性格古灵精怪的姜姜。
2018年12月，主演的都市爱情喜剧《
时光教会我爱你》播出，在剧中饰演全能女秘书Maggie。2019年，主演
胡储玺执导的古装剧《
亲爱的药王大人》，蔡祥宇在剧中饰演活泼可爱的大兴城商贾萧家大小姐萧雅；同年，她还出演了古装玄幻电影《天乩之天帝传说》。
2020年4月20日，主演的爱情喜剧《
报告王爷，王妃是只猫》播出，在剧中饰演天真烂漫、无忧无虑的西云族大小姐楚楚；5月22日，主演的奇幻喜剧电影《
仙书奇谭之捉妖簿》上线；12月，蔡翔宇主演的古装剧《亲爱的药王大人》和爱情喜剧《
报告王爷，王妃是只猫》分别入围第二届“云+”奖“年度甜宠剧”单元和“年度价值分账剧”单元。
2022年7月22日，再度与陈姝君、陈品延主演的爱情轻喜剧《
亲爱的柠檬精先生2》在优酷播出。2023年1月，参演
甄子丹主演的武侠电影《
天龙八部之乔峰传》上映，在片中饰演温柔婉约侍婢阿碧；1月31日，与
金沫汐、
蒙恩合作主演的古装爱情喜剧《
公子贵姓》开播，饰演角色则为玄凤鸣楼楼主沈伊。
蔡祥宇刚开始拍戏的时候也有过紧张、胆怯，但她还是依靠勤耕不辍的努力，掌握了在镜头前的感觉、走位等表演技巧。在电视剧《报告王爷，王妃是只猫》中，蔡祥宇将角色中楚楚的人物性格精准拿捏，表演细节也把控得恰到好处。此外，私底下的蔡祥宇其实是一个开朗活泼的90后女孩。（网易娱乐、中华网娱乐评）
蔡祥宇塑造了很多角色，在保留自身特色之余，打磨的角色完美贴合剧情，让观众们记住了她的名字和自如的演技。在电视剧《亲爱的柠檬精先生2》中，蔡祥宇认真揣摩 “叶婷”在面对不同境遇时的心情，对每一场戏都潜心研究，用心体会叶婷的成长和心理变化，稳扎稳打的演技让观众极有代入感。（北青网评）